南方鲇(Silurus+meridionalis)orexin基因克隆及表达.pdfVIP

南方鲇 （Silurusmeridionalis）神经肽YcDNA克隆和序列分析 杨雁 彭焕文 李艳利 尹传龙 罗毅平 张昊星 西南大学生命科学学院，淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室，重庆400715 神经肽Y(NeuropeptideTyrosing，NPY)是一种由36个氨基酸组成的多肽， 广泛分布于中枢神经系统和外周神经系统中，尤其在端脑、视前区、视顶盖以及 下丘脑含量丰富，是脊椎动物中最保守的神经肽之一。鱼类的神经肽Y具有调节 摄食、生殖、应激、心血管功能、体温、生物节律、性逆转、垂体激素的释放等 多种生物学功能。 关键词：NPY;cDNA;RACE;克隆；南方鲇 南方鲇 （Silurusmeridionalis）orexin基因克隆及其表达 彭焕文 杨雁 尹传龙 李艳利 罗毅平 张吴星 西南大学生命科学学院，淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室，重庆400715 Orexins（食欲素）是下丘脑神经肽，由orexin-A和orexin-B组成，主要 在调节摄食、醒睡周期、能量平衡和生殖过程中起重要作用。本文通过RT-PCR 和RACE技术从南方鲇脑组织中克隆了orexin基因eDNA序列。OrexincDNA序 列全长707bp，包含38bp5端非翻译区、477bp开放阅读框和192bp3端非 翻译区;编码区编码158个氨基酸残基，由39个氨基酸残基信号肽、48个氨基 酸残基成熟肽oreixn-A、28个氨基酸残基成熟肽orexin-B、两个水解位点甘氨 酸-赖氨酸-精氨酸(GKR)和33个氨基酸残基C端组成。氨基酸多重比对分析表 明，南方鲇orexin基因编码氨基酸中有一个16个氨基酸的插入序列;构建进化 树显示，南方鲇与斑马鱼(Daniorerio)和金鱼(Carassiusauratus)处于同 一分支，说明南方鲇orexin与斑马鱼、金鱼关系最近。通过QRT-PCR技术研究 orexinmRNA在7个组织 （脑、肝脏、肾脏、心脏、胃、肠和鳃）、5个发育阶段 （受精卵、囊胚、原肠胚、神经胚和出膜后第一次摄食前）和不同摄食条件下 （摄 食、饥饿、再摄食）脑组织中表达情况。 关键词：orexin;cDNA;RACE；克隆;南方鲇 草鱼squint(Nodal相关基因1)的分子与功能鉴定 赵太强 杨璐 汪新艳 周红 电子科技大学生命科学与技术学院，成都610054 Nodal是TGFβ超家族的重要成员之一，在脊椎动物 （包括硬骨鱼）胚胎发 育中发挥重要作用。在硬骨鱼中，存在三个Nodal相关基因(ndr):squint(ndr1)、 cyclops(ndr2)和southpaw(ndr3)。然而，在鱼类非胚胎细胞中，Noda1相关 基因的功能尚不清楚。在此研究中，我们获得了草鱼squint(gcsqt)的全长cDNA 序列。组织分布研究显示，gcsqt在所有检测的组织 （包括垂体、脑、心脏、头 肾、肾、脾和性腺）中均有表达。进一步地，我们使用原核表达系统、镍离子亲 和纯化及NDSB201辅助复性，得到了squint的二聚化活性蛋白rgcSQT。