中国汉族人MDR1遗传多态性分布特征.pdfVIP

中国汉族人MDRl遗传多态性的分布特征 徐萍，何娟，李焕德中南大学湘雅二医院临床药学研究室(湖南长沙人民中路139#， 410011) G2677T／^和C3435T单核苷酸多态性，分型结果通过DNA测序来进行验证。应用PHASE 2．0来构建 MDRl的单倍体型，各位点之间的连锁不平衡关系通用S}IEsis软件进行分析。结果C3435T、G2677T／A 和C1236T三个主要SNPs的发生频率与其他亚洲人群中的研究结果相近，并且在这三个位点之问存 在者较强的连锁不平衡关系，但在本研究中并没有发现G1199A这个位点存在多态性。以C3435T、 人中的发生频率相似，C-A-C、C-G_c、T_G．c和T-T-T是中国汉族人中的四个主要单倍体型。在今 后中国人群的研究中不必过多考虑Gll99A的影响。 关键词lMDRI，ABCBl，geneticpolymorphism,SNP：Haplotypes 人类编码P-糖蛋白的基因，于1986年首次从药等的外向转运n”村．G1199A在白人中的发生频率 发生多药耐药的肿瘤细胞株中被纯化出来，并命名 为6．5％’11％峨”1，但该位点在中国人中是否存在多 为MDRlIIl，现被统一命名为AliBI。AJ览B1位于7态性，突变频率是多少，与其他SNPs，如C3435T 等，是否存在连锁不平衡，在该项目立项时都还不 号染色体长臂上，全长超过lOOkb，包含28个内含 子，其中26个位于蛋白编码序列区。其mRNA总长得而知。所以本试验的目的就是查明中国汉族人 (占中国人口总数的92％’98％)中G1199A、C1236T、 4．7kb，也就是说编码区不到全长的5％嘲。1989年， Kioka等首次报道在正常人肾上腺中发现了P_gpG2677T／A和C3435T的分布频率及连锁不平衡关系， 并在此基础上构建ABCBI的单倍体型。 存在Glyl85Val和Ala893Ser的置换n1，后来被证 实这两个氨基酸的置换是由于基因突变的结果。 1．材料与方法 1998年，Mickley等通过核酸酶保护分析检测到两1．1实验材料 个基因突变位点，即位于2l号外显子的G2677T和 TaqDNA聚合酶，dNTP和限制性内切酶 24号外显子的G2995AHl。2000年，Hoffmeyer等首Sau3AI。XbaI。Afal，HaelII，购自宝生物工程(大 连)有限公司：引物由上海英伟创津公司合成。其 次通过DNA全测序对188个白种人的MDRl基因多 态性进行了系统筛查，共发现了15个单核苷酸多 它化学试剂苯酚，氯仿，EDTA，溴乙啶，Tris碱， nucleotidepolymorphism。SNP)…。无水乙醇等均为分析纯试剂。 态性(single 随后，很多实验室和研究者对不同人群的ABCBl基1．2实验对象 因多态性进行了筛查和分析，到目前为止，在不同 207人(男107人，女100人)参与了本实验， 人群中共发现了近50个SNPs嘲．不同人群中ABCBI其平均年龄为22岁(18-32岁)，平均体重为 SNPs发生频率存在着明显种族差异，如常见位点 56．8±8．9kg，均为汉族人。整个实验方案得到了 C3435T和G2677T／A在非洲人、白种人和亚洲人群中南大学湘雅二医院伦理委员会的批准，受试者在 中存在着显著差异H。”． 参与临床试验前都签订了知情同意书。且通过身体 由于发生频率高及其对P一糖蛋白表达和功能 体格检查和实验室检查被认为是身体健康者． 1．3试验方法 的影响，位于26、2l和12号外显子区域的C3435T、 1．3．1 G2677T／A和C1236T在不同人群中都是肋匕甜最受PCR-RFLP分型方法 1-3．1．1C3435T 关