猪圆环病毒2型检测和免疫技术研究进展.pdfVIP

·18· 第二届南京农业大学畜牧兽医学术年会论文集 猪圆环病毒2型检测与免疫技术研究进展 蔡宝祥 (南京农业大学，江苏南京210095) 疫苗和核酸疫苗两类。 关键词：猪圆环病毒2型；检测技术；疫苗 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪断奶后多系 组Cap和Rep蛋白作为抗原，通过反应重要条件的 统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。除引起PMWS优化，建立了间接ELISA方法，且有较好的特异性 外，PCV2还能引起母猪繁殖障碍，仔猪先天性震颤和重复性，可用于PCV2抗体检测和疫苗免疫抗体鉴 等，并可能与猪皮炎肾病综合征(PDNS)呼吸道疾别诊断。 病复合征(PRDC)等病密切相关，还可造成一些传 染病的继发感染，已成为危害养猪业的又一种新的重 蛋白作为免疫原，利用杂交瘤技术获得两株分泌抗 要传染病。近年来该病受到国内外学者的高度重视， PCV20RF2蛋白单抗的杂交瘤细胞。交叉试验结果显 对其检测技术和免疫技术进行了大量研究，本文就其 示，这2株单抗没有与PCV，发生交叉反应，表明这 研究进展作一概要综述。 2株单克隆抗体是针对PCV2型特异性表位的。这一 结果为建立快速准确诊断PCV2的方法奠定了基础。 1 PCV2的检测技术 刘长明等∞1研究建立了一种免疫过氧化物酶单 PCV2单独感染时的症状和病变并无特征性，仅 凭此难以作出准确的诊断，必须借助实验室手段才能 过对IPMA反应条件的优化，组装了诊断试剂盒。研 进行确诊。目前研究较多的实验室检测技术有间接免 究结果表明，用IPMA检测PCV2人工感染猪血清， 疫荧光(IFA)、间接酶联免疫吸附试验(ELISA)、于感染后3周抗体阳转，第3～10周抗体阳性检出率 免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)、单克隆抗体为92．8％，与用重组蛋白抗原建立的间接ELISA符 以及多种聚合酶链式反应(PCR)技术等。 合率为89．2％，与其他几种猪病毒参考血清无交叉 1．1 PCV2抗体检测 反应。该试剂盒的研制为PCV2流行病学调查和疫苗 周继勇等…、崔尚金等【2]、先后应用IFA技术效果的评价提供了技术手段。 检测国内部分地区的规模化猪场血清，证明PCV2感1．2 PCV2病原体检测 染已在我国广泛流行。该方法具有良好的特异性和敏 由于PCV2的分离培养比较困难，且病毒在培养 感性，可满足流行病学调查、临床监测和疫苗抗体水 细胞上不出现细胞病变，因此常需用其他诊断方法确 平检测的需要。 基础的套式PCR、竞争PCR、多重PCR等。 林彦星等旧1应用原核表达的PCV2衣壳(Cap) 蛋白作为诊断抗原，初步建立了一种检测PCV2抗体 的间接ELISA方法。试验表明该方法具有较高的敏区，设计了3对引物，通过反应条件的优化，建立了 感性和特异性，适于大规模检测PCV2血清抗体的流 行病学调查。 的特异性和重复性，敏感性达10TCID如，可用于PM． WS的早期检测和诊断。 秦承学等M1将PCV20RFl和ORF2基因分别插入 杆状病毒和大肠杆菌表达系统，用亲和层析方法提纯 试验猪，在感染后选定的时间分别采集的血液、粪便 获得重组衣壳(Cap)与复制(Rep)蛋白，用细胞 融合技术获得2株Cap和Rep蛋白单克隆抗体，以重 第二届南京农业大学畜牧兽医学术年会论文集 ·19· 果与出现PMWS典型组织