mRNA 差异显示技术在植物学领域的应用.pdfVIP

浙江农业学报A以aA舒ic诚urae 刀峋初脚卯。臼20(2):144一148，2(X招 mRNA差异显示技术在植物学领域的应用 王新超 ，‘梅菊芬，2‘，杨亚军，‘’ (’中国农业科学院茶叶研究所，农业部茶叶化学工程重点实验室，浙江杭州31砚xX甩;2南京农业大学园艺学院，江苏南京21(X为5 摘 要:概述了近年来在克隆差异表达基因方面应用比较广泛的功丑NA差异显示技术的原理、优缺点及操作 过程中应注意的事项。并对最近几年该技术在植物生长发育基因、逆境胁迫基因、雄性不育机理和杂交优势 机理、激素调控应答基因等方面的研究现状做了综述，还提出了该技术在未来植物学研究上的应用前景。 关键词:mRNA差异显示;用工代R;植物基因;克隆 中图分类号:Q789 文献标识码:A 文章编号:1侧又一巧24(么刃8)m一0144一。 AdvanceinmRNAdiffere如tialdisP】ayreverse t川”贬℃riP柱onPCRanditsaPPlication 加加怕叮 WANGXin一chao，，Meiju一fen，，2，YANGYajun，，’ (’肠肠ofTeao”‘晓以乃二乡刀已叭科9，械刀。￡理ofA留它1边ure肠左匕“讯五加忿众心，服二月.山叮of鲍应动少以叙- 。 ，从热乎肋“刃伏涅沼，俄na;2石肠月ic遥边遥幼以肠拢岁of肠呼1堵月邵如山硬幼以U成渔朋妙，肠呼咭21之玖乃，。加“) Abst钧d”】旧入Adi瓜rentialdispl叮。 七a口犯nption，代R(DDRT-代R)isaUSe甸lec俪que for助园y云ngdiffe此11七al geneexPr巴犯】onat廿妞nSCri西onlevel.卫lepnllci禅esandcha俄te比ofDDR不PCRaJ记some majorp找犯司uresduringitsoP- 碱ionwere int联妇uc曰.Iisady田Iceindsvelo训记n园邵二，由欣猖比列ationgene，~ 川‘islnofm自esterileandbe咖- 515，卜。呻ne比gulalionalldcolll耐genein讨ants was 比view曰.卫犯即口IcationPI众平ectlveofDDR卜PCRwas 叫肠川出d inthe拌per. 心y””n七:m丑NA山瓜renti己di印lay;RT.PCR;训朋tgene;d朋e 真核生物一般有10万个不同的基因，而在 因的方法主要有扣除杂交(stlbtractivehybridiza- 单个细胞中，仅有约巧%的基因得到表达，产生 tion)[’1)、m丑NA差别显示(mRNAdiffe二ntialdis- 约巧(联)种n1RNA。正是由于这种基因表达的 PI盯。 ~ ription，DDRT.代R)[2]、代表性差 差异，使得各种生命现象得以有序地进行，因此 异分析(rep~ tatioI1aldifferenceana]ysisofcDNA， 研究基因转录成为研究生命现象的重要领域。 cDNARDA)[3]、基因表达系列分析(seri沮阴￡ysis 比较不同条件下细胞内基因表达的变化，可以帮 ofgeneexpression，SAGE)l4]、R凡尹与区域定向差 助我们了解控制生命过程的机理，并发现具有特 异技术偶联的DDRT.PCR(R日尹.Cou禅记donuin 殊功能的表达产物。目前分离克隆差异显示基 di，teddisplar，Rc4D)[51、抑制性扣除杂交(5叩-