DNA条形码技术应用于口岸吸血蠓类快速分子鉴定的研究.pdfVIP

第30届全国卫生杀虫药械学术交流暨产品展示会资料汇编 ·175· DNA条形码技术应用于口岸吸血蠓类 陕速分子鉴定的研究 贺骥1，宋福春2，苏水宽1，陈剑。，陈慧1，冯梅1，傅健1 (1．厦门国际旅行卫生保健中心，福建厦门 361012；2．安徽理工大学医学院，安徽淮南232001) 摘要：目的建立口岸吸血蠓类快速分子鉴定方法，提高鉴定效率和准确率。方法选择口岸区域采集 点，采集吸血蠓类。经形态学鉴定后，单只蠓提取基因组DNA，采用自行设计的cOl基因扩增引物进行扩增。 PcR产物经电泳鉴定后，进行双向测序。序列经分析后，去除引物序列和不稳定序列，进行拼接。提交至Nc— BI和BOLD数据库进行比对，并建立系统进化树进行验证。结果得到12个新序列，已登录至GenBank，登 录号为KF528689～KF528700。其中台湾蠛蠓的c0I序列(683bp)填补了NcBI数据库的空白．所得序列经 分析后可以将多种蠛蠓、库蠓很好地区分开。结论本项目所建立的基于吸血蠓类c0I基凶的DNA条形码 快速分子鉴定方法可以很好地鉴定各吸血蠓种，值得进一步推广应用。 关键词：c0I；DNA条形码；吸血蠓；分子鉴定；口岸 ofDNA in molecular Stlldy barcodingtechnologyappliedrapid iden尚cationof in bloodsuckingmidgesport HE ji8n J}，sONGFu—ch击，SUshui—k¨80，CHENJ涵nl，CHENH“，FENGMe}．FU (I．Xi姗肌砌把舢￡幻眦f‰”eZ m口如kore＆眦er，爿谊n胱凡361012，劬讹； 2．A砒越跏觇搿毋矿＆曲船e口甜7’ec^no锄，打伽：阮厅，232001，傩i船) 7Ib the and of themethodfor molec— Abstract： identi6cation，establish ObjectiVeimpmveenjciencyaccuracy rapid ularidentincationof in in the bloodsucking midgesports．IⅡethodsSelec“ngsamplingpointspons，andcollecting the DNAfbm the bloodsuckingmidges．AJlermorphologicalidentincation，extractedgenomic singlemidge．Amplified oxidasesubunit with us．After PCR c”ochmme I(COI)geneprimersdesignedby eIectmphoreticanalysis，theprod— uctswere bidirectionaIIy．After the and se— sequenced sequencesa