胰岛素样生长因子及其Ⅰ型受体抗体对人肾上腺皮质癌SW-13细胞凋亡的调控.pdfVIP

南方医科大学学报fJSouthMedUniv) 胰岛素样生长因子及其 I型受体抗体对人肾上腺皮质癌 SW一13细胞凋亡 的调控 沈 文 一，冼 江 ，胡卫列 2，杨传红 3，夏 冰 (广州军区广州总医院 泌尿外科 ，医学实验科 ，广东 广州 510010，南方医科大学研究生学院，广东 广州 510515) 摘要 ：目的探讨胰 岛素样生长因子及其I型受体抗体对人肾上腺皮质癌 SW-13细胞凋亡的调控和其可能机制。 方法 原位凋~(TUNEL)法检测胰岛素样生长 因子及其 I型受体抗体单独或联合作用于 SW-13细胞后细胞 的凋亡的情况 ． 同时观察细胞形态及数量的变化。 结果 各组细胞凋亡率 比较有显著统计学差异 (t90．001)，其 中单用IGF．I组或 IGF—II组 细胞凋亡率低于空 白对照组低于混合作用组低于单用 anti．IGF，IR组 ，而单用 IGF—I组和 IGF．II组 、 IGF—I+anti-IGF—IR组和 IGF-II+anti—IGF． 组组间比较无统计学差异 (P0．05)。加入 anti．IGF．IR组细胞形态也发生 了明 显的变化。 结论 胰岛素样生长因子可促进 SW．13细胞株 的生长 ，这与其抑制 了细胞凋亡有关，而这种生物学作用是 通过胰岛素样生长 因子 I型受体介导，胰岛素样生长因子 I型受体抗体可 明显抑制这种生物学作用 ．可能在肾上腺皮 质癌的治疗 中发挥重要作用。 关键词 ：肾上腺肿瘤 ；生长调节素类 ；细胞培养 ；细胞凋亡 中图分类号：R736 文献标识码 ：A 文章编号：1673-4254(2008)10．1900—03 胰岛素样生长因子(IGF)包括 IGF．I、IGF．II具有 SW一13细胞于含 10％胎牛血清的L．15培养液 促进正常细胞生长分化的生物学作用，研究表明其在 中培养 ，每 3～5d传代 1次。待传代 3次细胞状态稳 多种肿瘤组织中均有高浓度 自分泌表达 。在肿瘤的发 定后 ，取对数生长期细胞 ．用含 0．02％EDTA 的 展过程中起到重要的推动作用 。促进了肿瘤细胞的增 0．25％浓度胰蛋白酶消化 ，取含 10％胎牛血清的L．15 长而抑制了其凋亡。IGF主要通过 IGFI型受体 培养液制成细胞悬液。 (IGF一 )发挥其生物学效应。本实验采用原位凋亡 1．3原位凋亡法检测细胞凋亡率 (TUNEL)法观察人肾上腺皮质癌 SW一13细胞株在 将制备好 SW一13细胞悬液按4x105／ml浓度接种 IGF和 (或)anti—IGF一 作用下体外培养时细胞凋亡 于4个 6孔培养板 中，每孔 3ml，孔内置无菌盖玻片 率的变化 ，以了解 IGF及 IGF．IR在肾上腺皮质癌的 l块。于接种 7h细胞完全贴壁后在其 中9孑L加入 发展过程中所起到的生物学作用，并为肾上腺皮质癌 30 g新鲜配置的anti—IGF．IR，于接种 8h后选取未 的治疗提供基础性资料。 加试剂的6孔和加入anti—IGF．IR的6孔分别加入 l5 ng或 3Ong新鲜配置的IGF．I或 IGF．II。设计为空白 1材料和方法 对照组、阴性对照组、阳性对照组(以上三组未加任何 1．1仪器与试剂 试 剂 )，IGF—I组 (IGF—I浓 度 5ng／m1)，IGF—II组 苏 州 净 化设 备 厂 产 SA—IIA 生 物安 全 台 ； (IGF—II浓度 10ng／m1)、anti—IGF—IR组 (anti—IGF．IR浓 Napco5410型CO