胡麻不同抗性材料接种尖孢镰刀菌病菌后几种酶的变化.pdfVIP

2003年中国作物学会学术年会论文集 胡麻不同抗性材料接种尖孢镰刀菌病菌后几种酶的变化 王海平1 李景欣2李心文1 (1内蒙古农业大学农学院 呼和浩特010018；_内蒙古民族大学通辽028042) 摘要通过对胡麻抗、感材料人工接种尖孢镰刀菌(Fus盯ium f oxysporum sp．1ini)NB2(经分离、纯化、 鉴定后得到)前后的三种酶：多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(PO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活性的变 化特点的分析结果认为：接种后抗病品种PPO的双峰变化、PAL的单峰变化特点可以作为胡麻抗病性 鉴定的生理生化依据。 关键词 胡麻胡麻枯萎病 多酚氧化酶(PPO) 过氧化物酵(PO)苯丙氨酸解氨酶(PAL) 许多研究[4,51表明抗性不同植株材料感染枯萎病菌后与抗病有关的几种酶(苯丙氨酸解氨酶 以作为植物材料对枯萎病抗性鉴定的生理生化指标。本文通过对同一地区不同抗性胡麻稳定品系 进行苗期接种同一尖孢镰刀茵，测定一定时间内植株的三种酶(PPO，PO，PAL)的活性变化情况，以 寻找一可靠的鉴定胡麻抗病性的生理生化指标。 1 材料与方法 ’ 1．1人工接种方法 培养小苗，待小苗长出七片真叶时以孢子悬液(配制参考“1)进行人工接种NB2菌株(经分离、纯 化、鉴定后得到)，接种浓度为1．0x107个孢子／ml，接种方法参考方中达《植病研究方法》(第三 版)，采用根部局部轻微创伤后蘸根。在接种前对各植株材料采样作为对照。接种后的12、24、36、 48、60h时各分别采样一次。采样方法为每材料取幼苗根茎部0．29左右，重复3次。并以不接种 的材料作为对照。 1．2 酶液的提取 称取根茎组织0．29左右，加lml左右(根据材料的重量)无离子水，加少许聚乙烯毗咯烷酮， lmI左右(根据材料的重量)和少许聚乙烯吡咯烷酮，冰浴中研磨，10000r／min4。C下离心10rain，取 上清液贮于4E冰箱中用于苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活性的测定。 1．3 三种酶PPO、PO、PAL活性的测定 光度计上进行测定)。 2 结果与分析 2．1 未接种与接种前后各供试材料的多酚氧化酶(PPO)酶活性值及变化曲线 未接种各材料的酶活性AOD值见，活性变化衄线见图2—1；接种处理各材料的酶活性AOD 426 2003年中国作物学会学术年会论文集 卣 见 活生 变 曲线见图2—2。 0 任9 ””2：3=：二：：篇 O 8 O 7 0 6 0 5 0 4 O 一一§手一一∞E(1、司一蜘再琵驻 O 蒸 引埘，，驴_， 广勿岛 0 ㈣㈣㈣㈣㈣㈣㈨㈣∞ 0；0 旌 {I I 2 1I “， IH _1I 0 1 2 24 36 48 60 时f,rJ(小Fr,Jh) 州m 小Ⅱ『) 圈2—1未接种各材料(CK)中PPO酶活性变化图2—2接种各材料PPO酶活性变化 60h内的酶活性均大于感病品系。但在未接种情况下oo一45中PPO酶活性的变化特点也同时说 明了通过酶活性的变化不能完全反映出抗性的高低。从图2—2中可以看出，抗病品系相对于感病 品系PPO酶活性的变化有明显的变化特点：三种抗病材料接种后，在12h、36hPPO各有一个酶活 性高峰，表现双峰特点。而感病材料在0—12h内酶活性有下降的趋势，在48h后抗、感材料此酶的 活性均缓慢上升。可以推断，抗感材料分别接种后，抗性