反相高效液相色谱法同时测定化妆品中甘草苷和甘草酸的含量.pdfVIP

筛选 了甘草中典型活性成分三萜皂甙类 中的甘草酸 10rain后取上清液过滤，即得。 和甘草总黄酮类中的甘草苷作为检测指标，采用反相 1．4 色谱条件 高效液相色谱法建立 了同时测定上述 2种成分的检 色谱柱 ：CAPCELLPAKMG11C18(250171121 测方法 ，方法准确 、重复性好 ，可用于化妆品中甘草成 X4．6mm ×5 m)；流动相：乙腈一0．05Ao(体积分 分甘草苷和甘草酸的含量测定。 数 ，下同)磷酸溶液 ( ／V)梯度洗脱 (0～ 10min， 1 试验部分 15 ：85— 25 ：75；10 ～ 17m in，25 ：75— 32 ：68； 1．1 仪器与试剂 17 ～ 30m in，32 ：68— 80 ：20；30 ～ 35 min， LC一20AT高效液相色谱仪 (具二极管阵列检测 80：20—15：85)；流速 ：1mL／min；柱温 25℃；进 器)，日本岛津株式会社 ；MS204DU 分析天平 ，瑞士 样量 1O L。 梅特勒一托利多集 团；KQ一300DE超声仪 ，昆山市超 2 结果与讨论 声仪器有限公司；LG10—2．4离心机 ，定制 。 2．1 检测波长的测定 甘草苷标准物质 (纯度 100 )，中国药 品生物 对甘草苷和甘草酸标准溶液进行 了紫外扫描 ， 制品检定所 ；甘草酸铵标准物质 (纯度 93．1 )，中 结果显示分别在 276nm和 250nm处有最大吸收， 国药品生物制品检定所 ；乙腈为色谱纯 ；甲醇、磷酸 但甘草苷在 249nm处为峰谷 ，而甘草酸在 276nm 为分析纯；水为超纯水 。10份标示含甘草的化妆品 处吸收值也较低 。综合二者 的紫外吸收情况选用 均从市场上购买 。 237nm为检测波长，均可达到较高的检测灵敏度 。 1．2 标准溶液制备 2．2 色谱条件的选择 分别准确称取甘草苷和甘草酸铵标准物质各 甘草酸 自身带有三个羧基，甘草酸铵为其一个 12mg，置同一 20mL容量瓶 中，用甲醇溶解并定容 羧基结合氨基而形成 的的甘草酸单铵盐 ，在流动相 至刻度，即为混合标准储备液 (置 于冰箱冷藏保 中加入少量磷酸使流动相呈弱酸性 ，使甘草酸游 存)。取标准储备液适量 ，分别稀释至质量浓度为 离，因此实际上检测 的主峰即为甘草酸 的峰。同时 5．970～ 119．4~g／mL和 5．473～ 109．5~g／mL 适 当的酸性流动相可对甘草酸的峰进行扫尾 。由 的系列混合标准溶液 (甘草酸质量 =甘草酸铵质 于甘草苷 和甘草 酸在 同一色谱柱上保 留行为相 差 量 ／1．0207)。 比较大，因此采取了乙腈一0．05 磷酸溶液体系进行 1．3 样品前处理 梯度洗脱 ，结果表明，在 1．4色谱条件下二者的色谱 准确称取样 品 1g，置 10mL比色管 中，加 甲醇 峰峰形尖锐，分离效果好 ，各组分均可达到基线分 定容，振摇分 散样 品后超 声提取 20rain，离 心 离，见 图 1，故采用 了该流动相体系。 “ t D ( JL i II k ． 1 ．II． 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 时I