灰飞虱与水稻条纹病毒亲和性相关的RAPD 标记研究.pdfVIP

江苏农业科学 　2009年第 1期 — 23 — 灰飞虱与水稻条纹病毒亲和性相关的 RAPD标记研究 1, 2 1 1 李小力 , 魏邦庆 , 周益军 ( 1. 江苏省农业科学院植物保护研究所 ,江苏南京 2 100 14; 2. 南京农业大学植物保护学院 ,江苏南京 2 10095) 　　摘要 : 采用 47个随机引物对高亲和性灰飞虱群体与非亲和性灰飞虱群体进行特异性 RA PD 标记筛选 ,筛选出 1条 RA PD 随机引物 ,可扩增出较好的差异条带 ,并对高亲和性灰飞虱群体能扩增出 1条 1 200 bp 特异性条带 。推测这条特异性条带可 能作为灰飞虱与 R SV 亲和性相关的 RA PD 标记 。 　　关键词 : 水稻 ; 条纹病毒 ; 灰飞虱 ; 亲和力 ; RA PD 　　中图分类号 : S435. 11　　文献标志码 : A 　　文章编号 : 1002 - 1302 (2009) 0 1 - 0023 - 02 ( ) [ 7 ] 　　由水稻条纹病毒 R ice strip e viru s, R SV 引起的水稻条 检测 ,得到的带毒率为 0%的家系 ,其 F 代幼虫再一次饲毒 。 2 ( 纹叶枯病是水稻的重要病害之一 ,它由介体灰飞虱 L aodel 检测后所得带毒率为 0%的家系为非亲和性灰飞虱群体 。 p hax s tria tellus SB PH ) 以持久性方式经卵传播 [ 1 ] 。不同来源 1. 2　灰飞虱基因组 DNA 提取 的介体与病毒的亲和力有所差异 ,研究认为 :这种差异是可遗 参照 B aruffi等 [ 8 ] 的方法提取模板 DNA 并略做修改 。每 传的[ 2 ] ,通过杂交选育可以改变活跃传毒虫和非活跃传毒虫 个群体取 30 头左右的灰飞虱成虫 ,加入 200 μl 的研磨缓冲 的概率 ,对水稻条纹叶枯病毒传播介体进行连续 4 个世代的 液 [ 100 mmo l/L Tris - HC l (pH 值 9. 1) , 100 mmo l/L N aC l, 杂交和严格的人工选育获得了一个高效传毒的灰飞虱群 μ 200 mmo l/L 蔗糖 , 50mmo l/L ED TA , 5 g/L SD S, 100 g/m l蛋 体 [ 3 ] 。刘海建等将灰飞虱与 R SV 的亲和性互作关系分为 4 白酶 K ]充分研磨 。收集匀浆液 , 65 ℃温育 30 m in ,加入 55 个类群 :高亲和性灰飞虱 、中亲和性灰飞虱 、低亲和性灰飞虱 μl醋酸钾 ( 8 mo l/L )