CellSense生物传感器在重金属毒性分析中应用.pdfVIP

第四届全国环境化学学术大会论文集(I-,-明-) CellSense生物传感器在重金属毒性分析中的应用 王学江，王虹，赵建夫，陈玲 (污染控制与资源化研究国家重点实验室，同济大学环境科学与工程学院，上海200092) 对大肠杆菌(Eco／i)的生物毒性。研究结果表明，基于大肠杆菌(Kcoli)的CellSense生物传感器对几种 重金属离子的微生物毒性检测结果与传统的细胞计数法相同。CeliSense生物传感器毒性检测方法具有操作 简单、响应时间短、不受样品颜色和浊度干扰、可进行现场测定等特点，因此有着良好的推广应用前景。 关键词全细胞传感器；电子传递介质；重金属；毒性 O引言 近年来，人们提出了多种生物毒性测试方法来监测水中毒性物质对水生生物的毒性。传 统的生物监测以水蚤、藻类或鱼类等为受试对象，虽然能反映毒物对生物的直接影响，但是 这些方法存在周期长、成本高、方法复杂等局限性。由于微生物的生物机体小、种群数量大、 生长繁殖快、保存简单方便、对环境变化的反应快、生长条件便利，并且同高等动物有着类 似的物理化学特性和酶作用过程等特点，特别适合于生物毒性试验。因此，微生物学废水毒 性检测方法因其快速、灵敏、经济等特点得以迅速发展。 生物传感器因具有体积小、响应快、能在复杂的体系中进行快速在线连续监测等优势， 在环境监测领域日益受到重视。其中，以活细胞作为识别元件的全细胞生物传感器，是近年 来微生物传感器发展的热点。目前，研究用于废水毒性分析的有基于如发光细菌(1ureinous microbes)、硝化细菌(nitrifying sludge)等 cold为受试微生物构建新型CellSense 受试微生物的微生物传感器卜’。本研究以大肠杆菌(E coli)的 全细胞生物传感器，对H矿+、Cu2+、Zn2+、Ni2+等四种重金属离子对大肠杆菌(E 生物毒性进行了测定。 2材料与方法 2．1Cellsense全细胞生物传感器 CellSense生物传感器分析系统是一种基于氧化还原介质的全细胞电流型生物传感器。 在CellSense全细胞生物传感器中，固定于电极表面的微生物呼吸作用产生的电子通过氧化 还原介质作用，实现其在微生物细胞和电极表面之间的传递，从而形成生物电流信号被系统 以检测出来。当毒性污染物存在时，微生物细胞呼吸作用因受到抑制作用，从而表现为电流 信号变化。根据待测污染物对生物电流信息的影响程度来判断毒性的强弱，采用的评价指标 为半数有效浓度(50％effective 水污染监测，突发性水体污染事故的应急监测，各种污水处理中进水和出水毒性的检测(污 水处理厂)，废弃物毒性评估，地表水毒性的检测，油污染物毒性测试和监测等。具有灵敏、 快速、适时分析等特点。 2．2CellSense生物传感器毒性测定方法 极做参比)，覆盖聚碳酯膜进行菌体固定，冷藏24h后备用。将制备的微生物传感器电极安 置入Cellsense仪器中，浸入装有10ll】1营养基质的液槽中，在磁力搅拌条件下稳定运行5～ 10min后。加入苯醌作为电子传递介质(0AmM)，待电信号稳定后定量加入待测物质，进 行连续(约30min)抑制分析，此过程中，Cellsense软件系统将自动记录参与测试的电极电 流信号的变化情况，用于ECso计算。 3实验结果与讨论 6．5、66．0、1 112 第四届全国环境化学学术大会论文集(上册) 毒性作用与传统的细胞计数法所得结论相同6。试验表明，基于E．coli的CellSense生物传 感器用于毒性检测具有良好的灵敏性和可信性。 由于CellSense生物传感器毒性检测方法具有操作简单、响应时间短、不受样品颜色和 浊度干扰、可进行现场测定等特点，因此有着良好的应用前景。 图1几种金属离子对Ecoli毒性抑制曲线 表1几种金属离子的ECse和’rU值