RNA转录与调控14.pptVIP

第十四章RNA转录与加工 RNA的生物合成（转录） 基因表达：遗传信息从DNA通过RNA传递到蛋白质称为基因表达。 转录：遗传信息从DNA到RNA的转移。 RNA生物合成 转录：以DNA为模板的RNA合成 复制：以RNA为模板的RNA合成 （病毒，高等动物的特定组织） 不对称转录—DNA一条链作模板 不对称转录：DNA链中常常只有一条DNA为模板，转录生成RNA.这条DNA链为负(-)链，转录链，模板链，反意链，Watson链. 另一DNA为正(+)链，信息链, 编码链，有意链 Crick链. 不同基因的信息链并不全在同一链上,顺反子 一、RNA聚合酶 RNA聚合酶：以双链DNA的一条为模板，四种NTP为底物，催化RNA合成的酶，其序列与DNA有意链一致。 RNA聚合酶 （NMP）n+NTP （NMP）n+1 + PPi DNA,Mg2+(Mn2+) 1、原核细胞 RNA聚合酶（polymerase）— 几种RNA合成基本由一种酶催化 E．coli RNA聚合酶全酶由5个亚基组成 α2ββ’σ (ω) E．coli RNA聚合酶核心酶α2ββ’（不含σ） σ—起始因子；主要功能识别起始位点并与DNA形成稳定的复合物， 核心酶；催化各NTP（NMP）之间形成3‘-5‘-磷酸二酯键，使RNA延长。但不具有起始合成RNA的能力。 2、真核细胞RNA聚合酶—目前发现有三种Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 真核RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ存在于细胞核不同部位（核质，核仁），根据对α-鹅膏蕈碱（α-amanitinc）的敏感程度不同分类。 真核细胞RNA聚合酶的种类和功能 类型 分布 催化转录产物 α-鹅膏蕈碱的敏感性 Ⅰ 核仁 45srRNA_rRNA前体 不敏感 Ⅱ 核质 HnRNA(mRNA前体) 敏感 Ⅲ 核质 tRNA 5srRNA 中等敏感 二、基因转录的过程 模板的识别，起始，延长，终止 合成方向5‘—3‘ 与DNA复制不同处： 不需引物 以一条DNA—模板链（watson链）为模板(负链) 对应的链为编码链(正链),有意链 天然（双链）DNA作为模板比变性（单链） DNA更有效。 2、延长 随着核心酶在模板DNA上滑行，使模板DNA不断旋转，RNA链由5‘-3’方向延长，E.coli 37oC的转录速度为20-50bp/s 同时又可有另一RNA pol全酶结合到promoter上，开始新的转录，且DNA-RNA杂交链氢键不牢固，易分开。 3．终止—RNA链延伸停止，新生RNA链从三元复合物（DNA-RNA聚合酶-RNA）中释放出来 1 不依赖蛋白质因子(ρ)的终止 DNA模板有终止信号 合成的mRNA 3/ 末端富含G-C（回形结构）并带有一段寡聚U 寡聚U可能提供信号使聚合酶脱离模板 2 依赖ρ因子的转录终止 在终止部位，ρ因子沿新生RNA链到达依赖ρ的终止点（无寡聚U和GC区），ρ因子与RNA聚合酶结合，使三元复合体解体. 真核细胞转录的起始步骤比较复杂 mRNA基因的启动子在 -25bp 5’-TATA box -Hogness box -10bp GC box -75bp CAAT box（上游元件） 启动时还需起动增强子（enhancer）等多种因子 Homeo结构域（HD） HTH结构与DnaA结合 转录因子二聚体结构 三．基因转录的方式 1．不对称转录—DNA一条链作模板 不对称转录：DNA链中常常只有一条DNA为模板，转录生成RNA.这条DNA链为负(-)链，转录链，模板链，反意链，Watson链. 另一DNA为正(+)链，信息链（编码链），有意链 Crick链. 不同基因的信息链并不全在同一链上,顺反子 2．反向转录—以RNA作为模板合成DNA 逆转录酶：依赖于RNA的DNA聚合酶（反转录酶，） 模板:RNA,合成方向5‘-3’,底物:四种dNTP 是病毒（RNA病毒）基因转变为宿主细胞DNA的基因的感染转化过程，癌病毒基因在宿主细胞中形成的机理。 逆转录酶是一种多功能酶 以RNA为模板合成互补的DNA链，形成RNA－DNA的