水田冬季农业栽培模式研究.pdfVIP

维普资讯 7 宁波农业科技 1997 No．3 ／／= 含高必需氨基酸(HEAAE)转基因 马铃薯工程植株的培育 。 、 王光清 杨金水 蕴珠 葛扣麟 严成其 ， 厂 { (上海复旦大学遗传所) (宁波市农科所 7 摘 要 采用含有一段人工合成DNA序列编码一个富含必需氨基酸的蛋 白质的一个双元载体质 粒P吲 ，‘这段序列被置于马铃薯蛋白(Patatin)房动子的控制之下。P吲 质粒被导入含辅助质粒POV26e 的农杆菌c zt并用它来转化马铃薯叶盘和茎段 ·以期获得块茎中富含必需氨基酸的马铃暮基因工程 关键调 高必需氨基酸 马铃薯既是粮菜兼用作物和食品加工原 将对数期农杆菌稀释5O倍感染顼培养的叶盘 料，又是农业立体种植、增产增收的理想间套 与茎段，在看护培养基上共培养2天，再将其 作物 为改善和提高马铃薯品质，本研究以栽 转入筛选培养基培养，一个月后筛选到转基因 培马铃薯品种东农303为试材，把含高必需氨 细胞克隆 斑点法检测结果表明NPTi基因 基酸 (HEAAE)的基 因，通过采用含 P 和 转入马铃薯细胞并在愈伤组织中表达．用不同 PGV260的双元载体系统农杆菌苗株介导的 浓度多种激素混合配比的 14种分化培养基将 叶盘法和茎段法及擅株系统转化法转化，建立 马铃薯转基因克隆由愈伤组织分化成绿苗。为 了高效的遗传转化体系。现将试验结果简要汇 提高转基因植株的繁殖系数，采用转基因植株 总如下 的无菌苗在含激素 1毫克／升 KT及 附加 0．4 水解乳蛋白、6 蔗糖的MS培养基上暗 1 材料和 法 培养(19℃)进行离体气生块茎的诱导。 1 1．1 材料， 为证实马铃薯转基因细胞克隆和绿苗是 马铃薯品种：东农 303(市售)； 否含有 HEAAE，我们将转 基因的植株作 农杆菌 C ／P (含 HEAAE基 因和 NPTⅡ活性检测、斑点 DNA杂交、Southern NPT I基因){PGV260(含 GUS基因和 NPT blot分析，可溶性蛋白质含量的比较分析和马 I基因)。 、 铃薯转化植株与未转化植株块茎的水解氨基 1．2 方法 酸分析。 采用 P 和PGV 260双元载体系统农 2 结果与分析 杆菌菌株介导的叶盘法和茎段法及植株系统 转化法从马铃薯品种东农 303的无菌苗上剪 2．1 转基因细胞克隆的绿苗分化 取叶盘和茎段 ，预培养 2～3天．用液体培养基 试验结果，转基因细胞克隆在含有激素成 维普资讯 豆品种制约着生产规模，生育期长导致效益不 于劳动生产率和产品商品率的提高，规模经营 高 ；榨菜从棉地发展到水田等技术有待于进一 后对提高产品知名度、市场占有率都会有促进 步探索；雪菜、莱苔油菜等地方传统品种亦有 作用。 、 待于整理提高 。