结核分枝杆菌表面蛋白CPSA与PapA2诱导T细胞免疫应答分析.pdfVIP

第四届中国兽药大会——兽医微生物学、兽医生物制品学学术论坛论文集(2012年) 结核分枝杆菌表面蛋白CPSA和PapA2诱导T细胞免疫应答分析 刘珊珊1，韩文瑜卜，雷连成1，冯新1，孙长江1，姚翠梅1，高字1，赵红蕾 1吉林大学农学部畜牧兽医学院，长春130062) 摘要：从结核感染及结核治疗结束整个过程中的抗原特异性IFN-v反应动态变化是近来研究的热点，亦为筛选结核疫 苗候选基因提供新的研究方向。本研究前期工作中利用结核分枝杆菌(MTB)表面蛋白噬菌体展示文库进行血清学差减筛选共 株中具有不同的表达性，从而导致其对于结核患者血清和BeG免疫血清显示出不同的反应性。本研究利用流式细胞检测方法 异性IFN-Y反应差别，来评价不同感染期内特异性抗原引发的宿主T细胞反应，为筛选结核活动感染期相关毒力因子提供平 台，以期为筛选临床治疗标志标签和疫苗候选基因提供理论基础。 关键词：结核分枝杆菌；表面蛋白；抗原特异性IFN-Y反应；活动性结核患者；治疗后痰培养转阴性结核患者； 前沿：MTB表面蛋白介导病原菌与宿主相互作用，在致病过程中起重要作用，并影响宿主免疫防御，筛 选毒力相关表面蛋白，有助于了解MTB感染免疫机制。而分析抗结核治疗过程中表面蛋白抗原特异性血清 学及IFN～Y反应动态变化，进而筛选结核感染期毒力因子的是目前结核研究热点，亦为筛选结核疫苗候选 基因提供新的研究方向。结核治疗中迫切需要监视治疗效果的标志标签，鉴别与结核免疫保护相关的抗原 对于诊断、治疗监测以及研发新的结核疫苗都有显著意义。通过分析抗原特异性INF—y释放情况来监视抗 结核治疗效果，从而评价出该T细胞信号对于激发感染巨噬细胞活化杀死胞内寄生菌的能力。从结核感染 及结核治疗结束整个过程中的抗原特异性IFN—Y反应动态变化是近来研究的热点，随着新的免疫相关检测 方法ELISPOT技术的应用¨。，衡量TB感染过程中T细胞相关反应和临床相关性的研究得到广泛开展，尤其 release 是interferon—gamma 这些反应是通过加入ESAT一6等特异性MTB抗原来分析抗原特异性IFN—Y反应。其中，ESAT一6MTB早期分 泌蛋白在免疫鼠模型中能显著激发IFN-Y 活动性结核患者，对BCG免疫健康人群反应相对较弱临。，大量研究已经证实了常规IFN—Y释放反应对于临 床应用的重要作用，抗结核治疗过程和结束后整个过程中的抗原特异性IFN—y反应动态变化也有待深入广 泛的研究，关于抗结核治疗对于抗原特异性IFN—Y反应影响的研究结果一直存在着争议，事实上，一些研 究发现经过抗结核治疗后该反应性具有下降趋势∞一。，而另一些研究却显示上升或是持续的反应性∞。。而这 些IFN—Y反应性的多变性是由诸如检测方法，疾病不同阶段所导致病原菌数量及代谢阶段不同等因素所影 响，同时反应性也存在很大个体差异旧1。但所有研究均证实ESAT一6等MTB毒力因子表达需要在结核代谢活 动期和活菌状态下，而这些抗原特异性IFN—y反应在T细胞发挥快速功能效应时具有高表达性。抗结核治 疗明显降低了MTB的复制活性，而抗原特异性T细胞反应也相应下降，从而进一步证实这些抗原可能是MTB 感染宿主后诱导机体产生的靶向免疫保护抗原。既然T细胞免疫效应反应是由病原菌数量，也就是存在复 制能力活性MTB菌量所决定的，经过有效抗结核治疗后，抗原特异性免疫反应也相应下降u引。通过监测抗 结核治疗过程中抗原特异性IFN—Y反应变化从而鉴别结核活动期毒力因子，是目前筛选MTB检测及疫苗候 选基因的另一策略。 本研究前期工作中利用结核分枝杆菌(MTB)表面蛋白噬菌体展示文库进行血清学差减筛选共得到6个 株和BCG疫苗株中具有不同的表达性，从而导致其对于结核患者血清和BCG免疫血清显示出不同的反应性。 本研究利用流式细胞检测方法和ELISPOT方法评价在活动性结核患者以及治疗后痰培养转阴性结核患者之 作者简介：刘珊珊(1979．)，女，吉林省长春市，博士研究生。主要从事兽医微生物与免疫学工作 ·通讯作者：韩文瑜，教授，主要从事兽医微生物免疫学研究工作E-mail：hanwy@jlu．edu．cn ·___——204-·-·—— 细菌 结核忠者抗原特异性INFY反应变化来评价不瞄堪染期内特异性抗原引艘的宿士T细胞反戊能力，