结核病实验室诊断新技术地研究进展.pdfVIP

中闻防瘳枭志2007年10月第29卷增刊 23 结核病实验室诊断新技术的研究进展 吴雪琼 (中国人民解放军总医院第二附属医院北京 10009I) 结核病一直是发展中国家较严重的传染病，我 养检测系统：是生物梅里埃公司的产品。其原理是 国的结核病疫情也相当严重，近20多年来国内外 当检测标本经前处理接种于专用的7H9培养管后， 研究者对结核病的诊断、预防、治疗开展了多方面 如有分枝杆菌生长时，分枝杆菌生长过程中代谢产 的研究，现将结核病实验室诊断研究的主要进展简 生CO。，导致pH值改变，传感器颜色从绿色变为 要地概述。 黄色，仪器每10min自动连续地检测、报告结果。 优点：简便、快速，既能用于分枝杆菌培养，也可 结核分枝杆菌检测新技术 用于普通细菌培养，可进行药敏试验和初步菌种鉴 一、微生物学诊断新技术 定，无放射性污染。 1．Bactec TB460分枝杆菌快速培养仪：19774．分枝杆菌生长指示管(MGIT)：原理：与 Bactec 年问世、90年代初引进我国。原理：利用放射性 TB960相似，但无需特殊仪器，是依据细 “C棕榈酸为基底物的7H12B液体培养基培养分枝 菌氧耗量的一种荧光指示管，通过紫外灯检测结 杆菌，由于分枝杆菌生长分解“C一棕榈酸，产生放 果。优点：简便、快速、价廉。 射性CO：，其放射性强度与分枝杆菌的生长相关， 5．分枝杆菌培养基的研究：新的培养基：酸 仪器自动检测Co：含量，并换算成生长指数 (GI)，报告结果，检测标本中分枝杆菌只需4～25 7H9液体 d。此外，利用P_硝基一a一乙酰氨基一俨羟基苯丙酮培养基，培养的阳性率明显高于改良罗氏培养基， (简称NAP)对结核分枝杆菌(MT)复合群生长而且阳性报告时间明显缩短。 有抑制作用，而对NTM生长无抑制作用，在 6．噬菌体技术：噬菌体是一种细菌病毒，分 Bactec系统内加入NAP继续培养2～6d后，根据 枝杆菌噬菌体能在活的分枝杆菌细胞内生长，通过 生长指数可初步鉴别MT复合群和NTM。优点：噬菌体裂解试验可快速地鉴定活的MT。目前英国 BioteeLaboratories 简便、快速，可进行药敏试验和初步菌种鉴定，在 Ltd．公司生产、上海金浩科技 国内外已成为结核病诊断的标准参照系统之一。缺 生物有限公司代理了1个结核分枝杆菌快速诊断噬 点：只能初步菌种鉴定；仪器价格昂贵；需专门进 菌体法(FAST TB“)试剂盒。(1)噬菌 Plaque 口专利液体培养基，费用较高；因有放射性，正逐 体扩增法的原理：分枝杆菌噬菌体可感染相应的活 渐被非放射性的快速培养方法所代替。 的分枝杆菌，若临床标本中含有相应的分枝杆菌， 2．Bactee TB960分枝杆菌全自动快速培养方噬菌体可侵入菌体内进行大量繁殖，最终裂解菌 法：1996年美国BectonDickinson公司研制，功能 体，释放出噬菌体感染指示细胞，并使指示细胞裂 与BactecTB460相似，但无放射性污染。原理：解，在琼脂板上出现噬菌斑。若临床标本中无相应 用硅树脂将荧光底物包埋在专用的7H9培养管底 的分枝杆菌，噬菌体将被加入的噬