利用远缘杂交创造核果类果树新种质地研究.pdf

利用远缘杂交创造核果类果树新种质的研究① 陈学森扬红花刘焕芳李玉晖冯宝春 (山东农业大学果树生物学实验室，泰安271018) 摘要以挑、杏、李、樱桃、杏梅等较果类果树的14个品种为亲奉．3年来共进行了80余个组合的远缘 杂交试验，探讨了桔果类果树远缘杂交的亲和性，井对远蝽杂种幼胚进行了胚抢救。结果表明：①铃铛花期授 粉的坐果率显著高于初花期授粉的坐果丰；⑦同一杂交组合，正反交坐果率差异显著，母本对远缘杂交亲和性 影响很大，选择自史亲和或自然坐果率高的种或品种作母皋容易克服远缘杂芟的不索和性；o适宜场强的静电 场、He—Ne激光处理覆60铆射残与He—Ne激光联合处理花粉均能显著提高花粉高体萌芽率。用上述处理的 花粉进行的远缘杂交坐果率也明显高于对照；60Coy射线单独处理则降低了花粉离体萌芽率，远缘杂交的坐果率 也低于对照：④对远缘杂种幼胚度时地进行胚抢救．井诗导形成多丛芽，是克服校秉类果树远缘杂种不育性的 有效方法，研究并筛选出了李、樱桃幼胚萌发与生长、多丛芽谤导与增殖以厦生根培养等最佳培养基配方。目 前已将欧洲甜樱桃x中国樱桃、‘大石早生’孛x‘泰安巴旦水杏’度‘凯特’杳ב总统’孛等一批核果类果 树远缘杂种定植于露地，其中欧洲甜樱桃与中国樱桃的种同杂种是国内外首次获得。 关键词核果类果树；远缘杂交；杂交亲和性；胚抢救；新种质 利用亲缘关系较远的种、属间的远缘杂交，比品种间的常规杂交，可产生更加丰富的遗传变异， 是种质创新的有效途径之一。果树的远缘杂交育种虽然已有几十年的研究历史，并取得了一些进展， 获得了一些远缘杂种材料(1】。但远缘杂交仍然存在诸多障碍，主要表现为：由于各种原因导致的杂交 不亲和，不能实现双受精；幼胚停止发育；幼胚中途死亡；杂种不萌发；幼苗中途夭亡等”j。针对远 缘杂交存在的上述障碍，笔者开展了系列研究，首次提出并实施了“三级放大”的研究思路与研究方 案，即利用静电场、激光等处理花粉和蕾期授粉等措施克服核果类果树远缘杂交的不亲和性，提高远 缘杂交的坐果率(一级放大)；对远缘杂种的幼胚进行胚抢救，获得更多的远缘杂种或基因型(二级 放大)；研究并建立杂种胚培苗多丛芽荐生技术体系，扩大每个杂种或基因型的群体，保证每个杂种 胚培苗在田间定植成活，防止因杂种胚培苗中途死亡而导致的基因型丢失(三级放大)。几年的研究 结果表明，提出并实施的上述研究思路是有效的，目前已研究并建立了樱桃、李等核果类果树远缘杂 种胚抢救、多丛芽诱导、生根培养及移栽等技术体系，并将欧洲甜樱桃×中国樱桃等一批远缘杂种定 植于大田，为进一步的育种及有关研究提供了种质12,4,5,6]。 1材料与方法 1．1材料 试验于2001～2003年在山东农业大学果树生物学实验室、山东农业大学泰安横岭果树育种试验 基地及泰安南许果园进行。试材包括‘泰安水杏’、‘红丰杏’、‘新世纪杏’、‘凯特杏’、‘泰安杏梅’、 ‘总统’李、‘大石早生’李、‘曙光油桃’、‘中华寿桃’以及‘红丰’、‘养老’、‘那翁’及‘红灯’ 等4个甜樱桃品种，‘莱阳长把红樱桃’和‘平度长把红樱桃’2个中国樱桃品种。树龄3～5年生， 树势健壮，生长结果正常。 资助项目。 新品种选育与资源研究 1．2方法 1 2．1花粉的采集及处理根据父母本的花期，分别进行温室催花或采集田问显蕾期的花粉， 室温条件下阴干，置干燥器于1～2℃的冰箱中保存备用。‘泰安水杏’、‘新世纪杏’及‘曙光油桃’ 负高压静电场处理在山东农业大学物理系进行，丫射线处理在山东农业大学辐照中心进行。 1 22花粉萌芽率的测定采用常规方法进行。培养基成分包括10％蔗糖，1％琼脂和0．03％ 硼酸，在发芽环、载玻片及盖玻片上接种，20℃条件下培养。接种后4～12h在显微镜下统计萌发花 粉数，计算萌芽率。 i．2．3去雄、授粉度坐果率调查采用陈学森等(1989)连被去雄法人工去雄，授粉后4周统 计坐果数，计算坐果率，取2年平均值，并以坐果率高低为指标，评价不同处理对核果类果树远缘杂 交亲和性的影响。 1．2．4杂种幼胚的萌发及生长培养杂种果实经表面消毒后，剥开种皮取出胚接种到培养基中。 以1／2MS、MS、Tukey作为基本培养基，分别设置不同浓度配比的激素配方筛选适宜的胚生长培养 基。 1．2．5胚培茁多丛芽谤导与增殖培养将经过生长培养的胚培苗接种到以MS或1／2MS为基本 培养基，加入不同浓度的BA(1．2--2．0mg／L)、I