细菌DNA参和全身性炎症反应综合征的初步研究.pdf

细菌DNA参与全身性炎症反应综合征的初步研究 第三军医大学全军烧伤研究所(400038) 周红 潘文东 鲁永玲 夏培元 秦孝建 肖光夏 第二军医大学西南医院综合实验研究中心(400038) 却 江 irdlarmtmlorv 近年来临床患者因细菌感染引起的全身胜炎症反应综合征(Sstemic re8P0nse5yndrome．SIRS)的死亡率居高不下， 固此进一步研究SIRS的发病机制及防治措施是当前的难点和热点： 菌细胞壁卜没有内毒素也可引起与G‘杆菌症状相似而且严重程度相当的SIRS厦脓毒症．原推测其细胞壁上的肽多糖、磷壁酸和 的物质 数卜年来作为遗传物质的细菌DNA一直认为无免疫学活性，但近年来通过对真核细胞与原棱细胞DNA的比较研究发现，细 菌DNA也具有一定的免疫学活陛，但是古参与SIRS的发生目前仍不清楚： ONA．EC 本研究以大腑杆菌DNA(Esc·herictdacoH nucleofides，Cr,GODN thymtl8DNA，CFDNA)、含有CvG基元的寡按苷酸1lcpc—oligodeoxy ODN 2．5’一11：CATGAGCTTCC 4：古有CpG基元寡核苷酸片段2(CpGoligodinucleitide，CPG 供实驻依据， DNA 奉研究首先眦EcDNA静肺注射正常昆明种小鼠，结果显示(I)、EcDNA可致小鼠死亡．而且具有明显的量效关系，Ec LD50为1I DNA导致的小鼠死亡作用产生影响，表明小鼠死亡并非由DNA中残存的内毒素 5rag／kg；(2)、”Co辐照址理井未对EC 所致，(3)．EC DNA经DNA酶处理后其引起小鼠的死亡作用消失【1／10)，表明小鼠死亡仅由ECDNA所致，提示EGDNA与LPS一 DNA与cT 样参与了SIRS的发生，(4)、CEDNA并不能导致小鼠死亡(0／10)，说明ECDNA在生物学活性上具有很大的差异。咀上 扔步证明小鼠死亡的确为ECDNA所敛而非LPS或其他因素，组织病理切片显示仅EcDNA组与LPS组病理损害相似，呈典型的 炎症病理表现：iJJ见细胞变性、灶性坏死、炎细胞浸润、毛细血管充血等非特异性的炎症表现，阱肝脏损害为重．肺、肾、心次之；小 牛胸腺DNA组末『见明显的病理损害。 其次采用D一氮基半乳糖敏化小鼠，达到破坏小鼠肝细胞功能、提高小鼠对影响因素敏感性的目的。细菌DNA对敏化小鼠致 DNA、MLO 死效应的观察表明：EC DNA、Cr,G ODN2则不能导致动物死亡。说明不论是革兰氏阴性细菌大肠杆菌DNA或革兰氏阳 100％(10／10)、100％(10／10)，而CE DNA、CpG ODN2均不能导致动物死 ODNl均可导致敏化小鼠死亡，而真棱细胞的cTDNA和cc序列颠倒的cpG 性细菌丝球菌DNA和cog 亡 为进一步证实Ec DNA或革 水平的升高常被作为SIRS发生中细咆因子级联反应的启动厦其严重程度的标志。结果发现不论是革兰氏阴性细菌EC 2则不具有此能力，提示机体免疫系统可能通过识别 ODNl具有诱导