瘦素(Ieptin)对体外培养ARC神经元KISS1%2fGPR54表达影响.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集 李方方，徐盛玉，．吴德’ (四川农业大学动物营养研究所雅安625014) 引言 I／GPR-54信 研究表明，动物体内Leptin水平会影响青春期启动。存在于下丘脑的KISS 号系统在人类、灵长类动物和啮齿动物及其他哺乳动物青春期启动发挥了至关重要的作用。 Leptin对繁殖轴的调节位点可能是作用于下丘脑KISSI基因，原位杂交表明小鼠(弓状核) KISSl mRNA表达量显著降低，Leptin注射部分恢复KISSlmRNA表达量。为了证实Leptin 对下丘脑ARC神经元细胞中KISSl表达的直接促进效应，本试验采用体外培养ARC神经元 信号途径调控KISSI／GPR．54系统表达。 材料与方法 本试验选择健康SD大鼠，雌性体重为2509时配种。妊娠18．5天脱颈处死母鼠，剖腹取胚 胎分离ARC核，进行原代培养。试验设计为8个处理，每个处理设6个重复。Leptin终浓度分 l基因、蛋白表 用AG490处理阻断JAK2／STAT-3信号途径，研究Leptir澍ARC神经元细胞KISS 达的影响。 结果 mRNA的表达(尸0．05)；O．3 l、LeptinjjflJ量和时间处理都显著的增加了KISSl ng／ml的 mRNA的表达(尸o．05)；2、0．3 Leptin处理显著的增加了GPR54 ng／ml的Leptin处理显著的增 加了G州W、GnRH-R、06求6 的表达量(尸0．05)：4、0．3 pJAl(2 处理组水平；7、0．3、0．6ng／mlLeptin处理上调KISSl 处理后KISSlmRNA表达下降到未处理水平：8、0．3、0．6ng／mlLeptin后促进GnRH激素的分泌 可以直接作用于ARC核神经元细胞，显著提高KISSl、GPR54及Ob．Rb基因表达，从而增加 表达，进而调控GnRH激素的分泌。 讨论 本研究发现ARC核神经元细胞中O．3 ng／ml的Leptin处理极显著的增加了GnRH激素的 分泌。前人研究同样表明，Leptin24h处理(1 N6细胞系中的表达。5uM的AG490处理抑制了添加O．3、0．6ng／mlLeptin后对磷酸化的Jak2 表达的促进作朋。JAK—STAT信号通路与其他信号通路如Ras．MAPK不同，它是一条直接信 号通路，STAT分子被磷酸化激活，二聚体化后直接进入核，STAT兼具信号转导和激活转录 的作用。而Ras．MAPK信号通路则要经过一系列信号分子的磷酸化、级联放大反应后才可激 活下游基冈的表达。因此JAK．sW盯信号通路被认为是～条作刚更直接、更快捷的信号途径。 ‘通讯作者；吴德，教授，四川农业人学动物营养研究所；E-mail：pi92pig@,sina．com 157