103013、103014班学生要写的实训报告.docVIP

包头轻工职业技术学院2011学年第二学期 生物制药技术专业103013班、103014班制药实训报告 姓 名 王殿 班 级 103014 学 号 微生物制药微生物制药的一般过程是什么？青霉素生物合成原理？青霉素二级逆流萃取法工艺流程？ 通过仿真实训软件的训练、考核，掌握了青霉素发酵、提取哪些具体工艺过程？ 青霉素的发酵水平尽管已达到60000-85000U/ml，但在发酵液中的含量只有不到4%，而且发酵液中含有大量无机、有机的杂质。含有大量杂质，含量很低的发酵液是不能直接用于临床的，而且青霉素在水溶液中也不稳定，故必须及时将青霉素从发酵液中提取出来，并通过逐步的纯化，得到纯的晶体或粉末，用于临床。????青霉素的钠、钾盐在水中溶解度很大，但苄青霉素本身在有机溶剂中的溶解度很大，溶剂萃取法提取青霉素就是利用这一性质。将青霉素在酸性溶液中转入有机溶剂中，并除去水溶性杂质。分离后再转入中性水中，除去酯溶性杂质，经过这样反复几次萃取，就能达到提纯或浓缩的目的。由于青霉素不稳定，整个提炼过程应该在低温、快速条件下进行，并严格控制pH，减少提炼过程中青霉素的损失。发酵液的预处理和过滤发酵液在放罐后要及时冷却，因青霉素在低温下较稳定，降温可以避免青霉素的迅速分解，然后进行第一次过滤，目的是滤去菌丝体,方法是用鼓式过滤机过滤。为了得到较多的发酵液和缩短过滤时间，一致要求在发酵菌丝自溶之前放罐。通过第一次过滤的滤液，pH为6.2-7.2之间，略发挥，呈棕黄色或棕绿色，液体中含有较多量的蛋白质和杂质。这些杂质必须除去才能在以后的提取中较顺利的提出青霉素，故必须进行第二次过滤，方法是用10%硫酸调pH?4.5-5.0，加0.07%（w）的溴代十五烷吡咯（PPB）同时加入0.07%（w）的硅藻土作为助滤剂，通过板框过滤机过滤即可。二次滤液一般澄清透明，可送去提炼，该工序青霉素的收率一般为90%左右。提取??萃取方法：青霉素在pH?2.5的酸性条件下，它在醋酸丁酯和醋酸戊酯的溶解度比水大几十倍，故二次过滤先用10%的硫酸将pH调低至2.0-2.5，在用醋酸丁酯或醋酸戊酯进行逆流萃取。此时青霉素和大部分酸性较弱的有机酸萃取到酯中而酸性较弱的有机盐、无机杂质、碱性化合物等杂质就留在发酵液中；当青霉素从酯中反萃取到水中时，大部分有机酸则留在酯溶液中，只有和青霉素酸性很近的有机酸才和青霉素一起转移。这部分杂质只有在精制中才能去除。影响青霉素提取的因素（1）pH青霉素在pH?5.0时最稳定，在5以下稳定性减小，在碱性溶液中则极不稳定。同时pH?2.0左右时青霉素在醋酸丁酯或醋酸戊酯中的溶解度比在水中的溶解度大40倍以上，而pH?7时，青霉素在水中的溶解度则大180-230倍，故在萃取时，从滤液萃取到醋酸丁酯时，pH需调至2.0-2.5；从酯液反萃取到水中时，将pH调至6.5-7.2，反萃取时pH的调控极为重要，只有在中性时，青霉素以盐的形式存在，转移也较为安全，如果碱性稍强，不但许多有机酸类杂质转移到水中影响青霉素的质量，而且青霉素极易被分解，青霉素生产中，将青霉素盐溶在水中所形成的溶液称为缓冲液。（2）温度青霉素及其盐类在高温下，稳定性大大降低，24℃时和0℃时稳定性即相差10倍以上，因此要求提取在低温（小于10℃）下进行比较有利。在提取上，一般用夹层和蛇管，通冷盐水进行降温，特别是酸性岗位，温度要求更低。(3)时间青霉素在提取中所停留的时间越短越好。停留时间越长，被破坏的青霉素就越多。并要求提取的设备良好，不发生故障。操作人员的操作技术要熟练。特别是酸性提取速度要快，碱化提取速度可以稍微放慢一些，因其在中性条件下破坏情况要比在酸性条件 仿真考核成绩 实训成绩 指导教师 4