植物激素常用提取分离和鉴定方法及在茶树上的应用.pdfVIP

2000 　第 2 期 5 植物激素常用提取分离和鉴定方法及在茶树上的应用 吴 　姗 　　骆耀平 (浙江大学茶学系 ,310009) 　　从种子萌发 ,植株生长发育到衰老及部分器官 IAA 、ABA 、GAs , 而 Dowex50 强阳离子交换柱或 脱落等等 ,都受到植物体内极微量的内源激素所调 国产 强 阳 离 子 树 脂 732 则 可 用 于 CT K 的提 ( ) [ 1 、7 - 9 ] 控[ 1 ] 。植物激素包括生长素 IAA 、细胞分裂素 纯 。但过柱后的粗提液若要进行测定则需进 ( ) ( ) ( ) ( ) 一步分离纯化 。Armstrong 等( 1969) [ 10 ] , 首次用交 CT K 、赤霉素 GAs 、脱落酸 ABA 、和乙烯 Eth 五大类 。它们在体 内含量甚微 , 一般水平为 : IAA 联葡聚糖 L H - 20 ( Sephadex L H - 20) 分离得到 1 - 100ng/ g FW 、GAs 1 - 1000ng/ gFW 、CT K 1 - 2iPA 和 ms - 2iPA 两种天然细胞分裂素 。Hillman 1000ng/ gFW ,ABA 10 - 4000ng/ gFW[ 2 ] 。且在植物 ( 1978) 和 Steen ( 1969) [ 11 、12 ] 用 Sephadex L H - 20 激素提取物中存在许多结构类似物等干扰激素测定 柱层析分离纯化了 ABA 和 IAA 。除了分子排阻色 的物质 , 因此从植物提取物中分离 、鉴定和定量分 谱柱 L H - 20 外 , 利用半制备 HPLC 柱如 Sep - Pak 析植物激素对测定技术的灵敏度和选择性有很高要 C18 、C18/ Porasil B 、C18 Bond Elut 之类键合相吸附 求 。 色谱柱[ 28 、29 ] 能得到较满意 的分离效果 。沈镇德 1 　植物激素提取纯化方法 等[ 13 - 15 ] 结合使用 Sephadex L H - 20 和 C18 柱替代 11 　提取 DEAE 、Dowex50 及氧化铝薄层层析纯化了 IAA 、 80 %甲醇是最常用的提取溶剂 , 但提取的方法 ABA 、GAs 和 CT K , 认为此方法不仅缩短时效 、 不同结果差异很大[ 1 、4 ] , 吴伯千等 ( 1992) [ 3 ] 的研究 提高纯度 、且提高了回收率 。此外 , 有用免疫亲和 认为 , 80 %的甲醇浸提茶叶新梢 8h 时 , IAA 达最 层析系统纯化CT K[ 16 - 18 ] , 并把此方法和间接竞争 大产额 ; ABA 在前 13h 提取过程中 , 提取速率较 酶联免疫法 ( EL ISA) 检测结合 , 测定 了 t - ZR 快 , 以后变慢 。乙醇丙酮等也常作提取溶剂被采用 ( ) [ 19 ] 反式玉米素核苷 和iPA 。 ( ) ( ) [ 5 ] 用 100 %冰冻乙腈提取 表 1 。陈雪梅等 1992 除柱层析法外 , 在溶剂萃取基础上 , TLC 法 IAA 、ABA , 经高效液相