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214 TianjinMedJ,Mar2014,Vol42No3
实验研究
miR-204对癫 神经元中BDNF/TrkB信号通路的影响*
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常 伟 潘立平 吴秋静 宋毅军
【摘要】 目的 研究海马神经元癫 模型中转染miR-204后对脑源性神经营养因子(BDNF)与TrkB通路调控
作用的影响。方法 取原代培养7d后的细胞,分为正常组、正常+BDNF组、癫 组、癫 +BDNF组、正常转染miR-
204组、癫 转染miR-204组、癫 转染miR-204+BDNF组。癫 组用无镁液处理3h制作癫 模型。制备成功
miR-204慢病毒表达载体。采用免疫荧光、膜片钳及免疫印迹技术鉴定及观察miR-204对BDNF/TrkB通路表达的影
响。结果 TrkB蛋白的磷酸化水平:正常+BDNF组高于正常组;癫 +BDNF组低于正常+BDNF组,高于癫 组;癫
+miR-204+BDNF组高于癫 +BDNF组和癫 +miR-204组。结论 BDNF及miR-204可以改善BDNF/TrkB受抑
制的状态,从而在癫 疾病的缓解中可能发挥重要作用。
【关键词】 癫 ;海马;神经元;受体,trkB;微RNAs;脑源性神经营养因子;miR-204
【中图分类号】 R749.1 【文献标识码】 A 【DOI】 10.3969/j.issn.0253-9896.2014.03.007
TheStudyofmiR-204 RegulatesBDNF/TrkBExpressioninEpilepticNeurons
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CHANGWei,PANLiping,WUQiujing,SONGYijun
1Grade2007,7-YearEducationalSystem,TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China;2DepartmentofNeurology,
GeneralHospitalofTianjinMedicalUniversity
[Abstract] Objective TostudytheeffectofmiR-204 onBDNF/TrkBsignalingandpathogenesisontheneuron
modelofepilepsy.Methods Primaryhippocampalneuronswereculturedinvitrofor7days,andweredividedintocontrol
group,control+BDNFgroup,epilepsygroup,epilepsy+BDNFgroup,control+miR204group,epilepsy+miR204groupandep⁃
2+
ilepsy+miR204+BDNFgroup.TheepilepsymodelofhippocampalneuronswasestablishedbybeingexposedtoMg freeme⁃
diafor3hours.ThemiR-204lentivirusvectorwasconstructed.TheeffectofmiR-204onBDNF/TrkBexpressionwasdetect⁃
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