新定量PCR数据处理方法的理论探讨.pdfVIP

遗# 传5?@?,9A（B#2C 2)/ ）%（’ ）：’ / ’. ，’# # # # # # # # # # # # # # # # # # # # # # 技术与方法 新定量!# 数据处理方法的理论探讨 ! ! ! ! ! 克丙申 ，李广云 ，陈世敏 ，黄象艳 ，陈英剑 ，徐# 军 （!$ 济南军区总医院免疫科，济南%’!； $ 济南千佛山医院中心实验室，济南% !( ） 摘# 要：日新月异的生命科学技术的发展及临床医学科学研究的需求，一般的)*+ 技术已远远不能满足工作的需 要。), 公司在进行了大量的)*+ 动力学研究的基础上，发现了利用荧光标记探针在)*+ 循环过程中积累的荧光 强度达到仪器捡出阈值时，系统的初始模板数量与循环次数之间有线性关系，据此建立了目前的), -- 、), %- 仪器的定量)*+ 技术，开创了)*+ 技术的新局面。但是由于这一技术的误差较大，尚不能满足生命科学及临床医 学科学研究的需求，因此需要继续研究新的定量)*+ 技术。)*+ 动力学数学模型是根据)*+ 技术的原理提出的， 能够准确描述)*+ 反应产物分子数量积累规律的动力学方程，给出了)*+ 产物数量或者荧光强度与初始模板数 量及其他反应条件间的函数关系。利用这一关系，根据)*+ 反应已积累的产物数量，可以实现准确的定量)*+ 分 析，得到初始模板数量达到定量)*+ 的目的。使用动力学数学模型做定量)*+ 分析，其结果的误差仅与使用的荧 光强度数值的精确度相关。使用精确到. 位数的荧光强度数据，模板数自! / ! 区间定量结果的准确性 可达001 以上。本文根据模拟实验数据进行了初步的定量)*+ 分析，结果提示，目前的定量)*+ 仪器使用)*+ 动力学模型理论处理分析数据，定量分析的结果会比目前的*2 值方法在准确性方面提高几十倍以上，可以满足各 方面研究工作误差水平的需要。 关键词：定量)*+ ；)*+ 动力学；动力学数学模型；荧光定量)*+ 中图分类号：3’( !# # # 文献标识码：4# # # 文章编号：%’ 5 0--（’ ）’ 5 ’ 5 % $ %’ ()*+, +- !.+/00123 4562)1)6)17 !# 86)6 ! ! ! ! ! 6, 789:;=9 ，?@ ABC9:;DB9 ，*E,F =8;G89 ，EH4FA I8C9:;DC9 ，*E,F D89:;J8C9 ，IH JB9 （!! #$ %’(#)’ *+ ,((-)*.*/0 ，12)%) 32.2’%0 4#)#%. 5*6$ 2’%. *+ 789 ，12)%) %’!，:;2)% ； ! ;# :#)’# 8%=*%’*0 *+ 12)%) 2%)+ #6;%) 5*6$ 2’%. ，12)%) % !( ，:;2)% ） $90).6/) ：2KLCM NOC9LCPL )*+ QC9RO NCO8NSM O= 9L KS T8KOQ=98UB LVWKXY9O C9L QW898QCW PNCPQ= C9M YKP$ 4SOP 9B; YPKBN LM9CY8Q PNCPQ= ，), QKYXC9M SKB9L O=P 8N C W89CP PWCO8K9 TOZ9 898O8CW OYXWCO 9BYTP C9L QMQW89: O8Y Z=9 O= CQQBYBWCO89: SWBKPNQ9O