链霉素抗性筛选井冈霉素高产菌株的研究.pdfVIP

维普资讯 安徽农业科学。Journal0fAnhuiA ．Sci．2OO7。35(28)-8930—8932 责任编辑 李布青 责任校对 俞洁 链霉素抗性筛选井冈霉素高产菌株的研究 牛莉娜，葛翠凤，葛绍荣 (四川大学生物资源与生态环境教育部重点实验室，四川成都6l0064) 摘要 对井冈霉素产生茵吸水链霉茵井冈变种SJ．6(Streptomyceshygroscopicusvat．JingganggensisYen)进行 uV和亚硝酸复合诱变，在含有 茵株孢子最小抑制浓度的链霉素培养基平板上，采用链霉素抗性筛选法获得大量的链霉素抗性突变株，筛选到突变株 UN-80，在摇瓶发 酵条件下，井冈霉素化学效价达 15943t,e,／ml，比出发菌株SJ-6提高了84．4％。该菌株连续培养5代，其化学效价基本稳定，具有较好的 遗传稳定性。 关键词 链霉素抗性筛选；UV诱变；亚硝酸诱变；井冈霉素 中图分类号 $476 ．1 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2OO7)28一O893O一03 stuarOnthe~ ptorayeinR鹤isbI-oeScreeningofHigh-~ laStraatof．Winggang~m NIULi．raietal (KeyI~oratoryofBio-resourcesandEco-environment，MinistryofEducation，SichuanUniversity，ChenNu，Sichuan610064) Abs act UVandnitrousacidc~lplexmutagenesiswasconductedonStr~otomyeeshygroscopicusvat．JingganggensisYensI-6producedJinggang~cin． Inthemedium platewithst~ tomycinatmininllm inhibitingconcentrationofstrainspores．alotofstreptomycinresistantmutantswereobtainedbystrep- tomycinresistanceseining，i~luaingthemutantUN-80．Undertheconditionofshakingflaskfermentation，theJinggangmyeinchemicaltiterreached15 943t,e,／m1．increased84．4％ thantheoriginalslrdinSJ-6．Aftereontlnuouslyculturedfor5generationsthestrainhadbasicallysatblechemicaltiterand betterhereditarystability． words Streptomycinresistancescreening；UV mutagenesis；Nitrousacidmutagenesis；Jinggangmycin 井冈霉素(Ji~ ycin)是在井冈山地 区发现的由一株 取上清液供测试用。抑菌活性检测平板培养基及培养条件： 吸水链霉菌(Streptomyceshygrosoopicusvat．JirlgganggemisYen) PDA培养基，28℃培养2～3d。 产生的农用抗生素，与 日本报道的有效霉素(Validamycin)类 1．2 方法 似，属碱性水溶性葡萄糖苷类物质，对水稻纹枯病菌(PeUicu． 1．2．1 单孢子悬液的制备。用无菌水从成熟孢子斜面上洗 1ariasa~tkii)有很强的生长抑制作用，具有药效高，无毒副作 下孢子，置装有玻璃珠的灭菌三角瓶中，振荡 2o～30min，使 用，持效时间长 以及尚未发现抗药性等特点，目前仍是防治 孢子分散活化，再经灭菌漏斗滤纸过滤，制成单孢子悬液并 水稻主要病害(水稻纹枯病)的首选抗生素，对我国水稻的高 稀释至 10个／rnl备用。 产、稳产起着重要的作用 I2J。由于井冈霉素产生菌发酵效 1．2．2 链霉素最小抑制浓