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* * * * 微生物纯种分离 （二）涂布分离法 微生物纯种分离 （三）定量稀释分离法 微生物纯种分离 （四）富集分离法 利用选择培养基 （五）单孢挑选分离法 利用特殊的显微操作仪 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 第一节 微生物细胞的化学组成 元素 细菌 酵母菌 霉菌 C 50 49.8 47.9 H 8 6.7 6.7 O 20 31.1 40.2 N 15 12.4 5.2 一、水（water） 二、干物质（dry material） 微生物 蛋白质 糖类 脂类 核酸 灰分物质 细菌 50~80 12~18 5~20 10~20 2~30 酵母菌 32~75 27~63 2~15 6~8 3.8~7 霉菌 14~15 7~40 4~40 1 6~12 第三章 微生物的营养与培养 1、 碳原：构成微生物细胞及其代谢产物中碳素来源的物质，是化能异养微生物的能量来源。 种类：二氧化碳等无机含碳化合物 小分子有机物，如葡萄糖、蔗糖等 大分子有机物，如淀粉、酯类等 第二节 微生物的营养物质 2、 氮原： N2 固氮微生物 有机含氮化合物 无机含氮化合物 第二节 微生物的营养物质 蛋白质（鱼粉，豆饼粉等） 蛋白胨 牛肉膏 生理酸式盐：(NH4) 2SO4 生理碱式盐： NaNO3 生理中性盐： NH4 NO3 3、 水 细胞的重要组分 细胞生化反应的介质及反应物 物质运输的载体 调控细胞温度 第二节 微生物的营养物质 4、 矿物元素（无机盐） 主要元素（大量元素） P, S, K ,Mg等元素通常以无机盐的形式添加 微量元素 通常不需单独添加 第二节 微生物的营养物质 5、 生长素 有些微生物生长必需的微量有机物质 常见的生长素有： 氨基酸，维生素，核苷酸等 第二节 微生物的营养物质 自养型微生物 可以在纯无机环境下生长的一类微生物 光能自养型 化能自养型 异养型微生物 必须依赖一种或一种以上可以吸收、利用有机物的存在才能生长的一类微生物 光能异养型 化能异养型 第三节 微生物的营养类型 第四节 营养物质的吸收 一、被动运输（passive transport） 不耗能，运输的方向取决于被运输物的浓度差 (一) 被动扩散（passive diffusion） 无渗透酶参与 特异性差 运输速度慢 一、被动运输（passive transport） (一) 被动扩散（passive diffusion） (二) 促进扩散（facilitated diffusion） 有渗透酶参与 特异性高 运输速度快 第四节 营养物质的吸收 第四节 营养物质的吸收 二、主动运输（active transport） 耗能，可逆浓度梯度运输 有渗透酶参与，运输特异性高 运输速度快 (一) 主动运输 不改变被运输物的结构 (二) 基团转位（group translocation） 改变被运输物的结构 第五节 微生物的培养 一、 培养基 （一）培养基的类型 1、根据营养物的来源 天然培养基 合成培养基 2、根据培养基的物理性状 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 3、根据培养基的用途 普通培养基 鉴别培养基 选择培养基 一、 培养基 （二）配制培养基的一般原则 1. 选用合适的营养物质 2. 确定各营养物的适当配比 3. 基质环境的调节 4. 营养原料的经济性 一、 培养基 （三）常用培养基的配制 普通细菌培养基： 配方： 牛肉膏 5g 蛋白胨 10g NaCl 5g 水 1000ml 或用营养琼脂配制 一、 培养基 （三）常用培养基的配制 放线菌培养基： 配方： 可溶性淀粉 20g 硝酸钾 1g 硫酸镁 0.5g 氯化钠 0.5g 磷酸氢二钾 0.5g 硫酸亚铁 0.01g 水 1000ml （三）常用培养基的配制 酵母菌培养基： 麦芽汁培养基 豆芽汁培养基 马铃薯培养基 麦芽汁培养基配制方法：干麦芽粉加4倍重量的水，55~60?C保温糖化3~4hr，碘液检验无变色后煮沸过滤，适当稀释调节pH至6.0，分装灭菌。 一、 培养基 一、 培养基 马铃薯