植物分子标记技术原理及其在茶树育种中的应用.pdfVIP

茶 叶 JournalofTea 2003，29(4)：191～194 植物分子标记技术原理及其在茶树育种中的应用 梁慧玲 梁月荣 (浙江大学茶 叶研 究所 杭州 310029) 摘 要 本文简述了限制性片段长度多态性(restrictionfragmentlengthpolymorphism，RFLP)、随机扩增 多态性 DNA(random amplifiedpolymorphicDNA，RAPD)、任 意 引物 PCR(AbitrayPrimer—PCR，APPCR)微卫星 (microsatellite)或称 简单 序列重复 (simplesequencerepeat，SSR)、简单重 复间序列 ISSR(Inter—SimpleSequence Repeat)、序列标 签位点 (sequencetaggedsite，STS)技术 和割裂扩 增多态性 (CleavedAmplifiedPolymorphicSe— quence，CAPS)技 术 ，扩增片段长度多态性 (amplifiedfragmentlengthpolymorphism，AFLP)等植物分子标记技术 原理，综述 了该技术在茶树分类学及遗传多样性的研究 、品种鉴定和亲缘关系鉴定、构建茶树的遗传图谱 以及分子 标记辅助育种等方面 的应用现状 。 关键 词 分子标记；茶树育种；RFLP；RAPD；APPCR；SSR；AFLP 中图分类号 ：Q751)$571．1；$331 文献标识码 ：A 文章编号 ：0577--8921(2003)04-- 191一O4 1 引 言 针 (即 RFLP标记)进行分子杂交 ，再通过放射 自显 遗传标记 (geneticmarkers)是基 因型特殊 的并 影 (或非同位素技术)实现的。与传统 的遗传标记相 易于识别 的表现形式 ，对遗传标记在杂交后代 的分 比，RFLP标记 具有 下列优 点 ：(1)RFLP标记无表 离类型进行分析 ，是 了解这些标记 以及与它们紧密 型效应 ，其检测不受外界条件 、性别及发育阶段 的影 连锁的其他基因所控制的遗传性的主要途径 。最早 响；(2)RFLP标记等位基 因问是共显性 的，非等位 的植物遗传标记是那些可直接观察到的影响植物形 基 因间不存在上位效应 ，互不干扰 ；(3)RFLP起源 于基 因组 DNA 的 自然变异 ，这些变异在数量上几 态性状的标记 ，如矮秆 、白化 以及叶片形态学 的改变 等 ；20世纪 60~70年代 ，同工酶 (等位酶)作为一种 乎不受限制 ，可 以选取足够数量能代表整个基 因组 的 RFLP标记 。RFLP标记 也有 其 自身 的不 足 ， 基 因的直接产物而被广泛用作遗传标记 [1]。8O年代 RFLP分析需要大量高纯度 的DNA，而且通常都用 以来 ，随着分子遗传学技术 的发展 ，特别是随着大量 同位素来鉴定 ，对技术、劳力及费用要求都 比较高。 限制性核酸 内切酶 的成功分离和提纯 ，基 于 DNA 同时，它的检测结果与 内切酶 的选用密切相关 ，只能 杂交的限制性片段长度 多态性 (RFLP)技术受到密 选用一定 的内切酶 ，某个位 点才可能表现 出多态性 ， 切关注 ，并被广泛用于遗传作 图、基 因标记 、系统与 而且它不能检测 出酶切后相 同长度 DNA 片段 内的 进化 等 研 究 领 域[2]。9O年代 ，聚 合 酶链 式 反应