海水养殖真鲷最小弧菌外毒素的免疫学特性初步研究.pdfVIP

第 30 卷 第 5 期 水 生 生 物 学 报 Vol . 3 0 ,No . 5 2 0 0 6 年 9 月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA Sept . , 2 0 0　6 海水养殖真鲷最小弧菌外毒素的免疫学特性初步研究 吴后波 　苏晓波 　潘金培 ( 中国科学院南海海洋研究所LED 重点实验室 ,广州 　510301) 摘要 :按常规方法免疫健康家兔进行外毒素抗体的制备 。将制备的兔抗血清与等体积的外毒素混合 ,37 ℃下作用 1 ( ) h 后 ,观察毒素的溶血性及细胞毒性 ,取免疫前家兔血清 零号血清 作阴性对照 ,用毒素作阳性对照 。结果表明 ,兔 抗毒素血清能中和毒素 ,抑制毒素对人血细胞的溶血性及对 Vero 细胞的细胞毒性 , 中和毒素的兔抗毒素血清最高 稀释度为 1 ∶256 ,毒素对照显示出溶血性及细胞毒性 。毒素与一定浓度的嗜水气单胞菌 HEC 毒素抗血清 、霍乱肠毒 素抗血清在 37 ℃下分别作用 1 h 后 ,观察其溶血性及细胞毒性 。结果表明 ,这 2 种抗血清都不能中和毒素 ,毒素与 这 2 种抗血清作用后 ,仍然保持其溶血性及细胞毒性 。用浓度为 02 %的福尔马林对浓度为 5mg/ mL 的外毒素进行 灭活处理 ,得到的灭活疫苗为毒素苗 。一定稀释度的毒素苗 ,在初次免疫真鲷 2 周后利用病原菌对免疫组及对照 组的实验鱼进行人工攻毒感染 ,毒素苗的免疫保护率可达 80 % ,强化免疫后 ,免疫保护率有所提高 。注射免疫的免 疫保护率比浸泡免疫的高 。 关键词 :VmPm 外毒素 ;HEC 毒素 ;霍乱肠毒素 ;毒素苗 ( ) 中图分类号 :S941 　　文献标识码 :A 　　文章编号 2006 ( ) 　　弧菌病 Vibriosis 是我国南方沿海地区养殖真 素 、霍乱肠毒素 以及 VmPm 毒素的抗原结构的同 鲷中发生的主要细菌性疾病 ,一年四季均有发生 ,流 源性进行了比较 。此外 ,用浓度为 02 % 的福尔马 行期为 5 —9 月的夏秋季节 ,高峰期为 7 —8 月份 ,受 林对浓度为 5 mg/ mL 的 VmPm 毒素进行灭活处 害最严重的为体长 10 —25cm 的当年鱼 ,该病的暴发 理 ,探讨了这种毒素苗对真鲷弧菌病 的免疫保护 性流行给整个真鲷养殖业造成了巨大的经济损失 。 性 ,为进一步寻找有效的防治措施打下了坚实的 ( 近年来我们在 明确其病原菌是最小弧菌 Vibrio 基础 。本文是有关 VmPm 毒素的免疫学特性的研 mimicus) 的基础上[ 1] ,对该菌的致病机理 ,特别是其 究报告 。 产生的外毒素进行了一系列的研究 , 已经证实该菌 1 　材料与方法 产生的外毒素是其真正的致病因子 ,这种外毒素为 单一的多肽 ,分子量为 30456kD ,具有溶血性 、细胞 11 　外毒素的分离纯化 毒性和动物致死性等多种生物学活性 ,该外毒素不 按吴后波等人[2 ] 的方法进行 。 同于最小弧菌产生的其他毒力因子 ,作者将其命名