脊柱关节手法对大鼠腰椎间盘炎性模型炎性因子表达的影响.pdfVIP

中华中医药学会推拿分会第十四次推拿学术交流会2013年10月·深爿 脊柱关节手法对大鼠腰椎问盘炎性模型炎性因子表达的影响 张威赵平+ (中国人民解放军空军总医院，北京100142) 采用腰椎间盘内注射完全氟氏佐剂的方法建立大鼠腰椎间盘炎症模型，采用专门设计大鼠腰椎手法模拟仪进行半定量手法 果使用SPSS软件处理。结果：HE染色结果显示，椎间盘组织内即有炎性细胞浸润，组织水肿，空泡变性，可见纤维组织 增生以及纤维组织部分胶原化及疑似新生血管形成。免疫组化结果显示：术后第一天，炎症组和各手法组IL一18、IL一1吕的 表达明显升高，第三天达高峰，与炎症对照组相比，各手法组的炎症因子表达量呈下降趋势，其中术后第三天下降最为显 著性①o．05)。结论：脊柱关节手法可能通过降低椎间盘组织中的炎症因子的表达量而发挥镇痛作用。 【关键词】：脊柱关节手法，大鼠椎间盘炎症模型，手法模拟，白介素18，白介素1B 长期以来，关于脊柱关节手法治疗治疗腰椎间盘突出症 3、手法模拟：主要选择国际最为广泛流行的脊柱关 (腰突症)的机制问题一直争议不断，这既与脊柱关节手法 节调整术(vertebral 治疗腰突症的研究缺少动物实验基础有关，其原因盖在于其 虽为针对脊柱软组织损伤类疾病的保守治疗方法，但缺乏系 节旋转角度都为±20。，旋转完成时间在0．5秒内为调整手法， 统、科学的总结【1】，也与脊柱关节手法疗效与风险共存的“双 在2秒内完成定义为松解手法。两组每天实施一次模拟手法。 刃剑”效应【2】有关。既往研究大多集中在脊柱手法的生物力 4、大鼠手法模拟试验仪器：空军总医院全军中西医结 学影响方面【3]，而由于脊柱手法的动物实验模型难以实现， 合正骨中心与北京师范大学共同研制，可以客观量化地模拟 很难就腰突症过程中各种炎性介质的表达进行观察。因此， 上述脊柱关节旋转手法(具体原理另文介绍)。 本研究通过建立大鼠的腰椎间盘的炎性模型，半定量机械模 5、取材及HE染色：在注射弗氏佐剂后的1、3、5、 拟不同类型的脊柱关节手法，探讨脊柱关节手法对间盘源性 7天四个时间点，每个时间点实验组和对照组动物，再次麻 的炎性病理改变进行免疫组化试验研究，进而探讨脊柱关节 醉后剪开胸腔，经左心室向主动脉插管，自右心耳剪一小口， 手法对腰椎间盘源性下腰痛的治疗基础和风险因素。 有研究表明，椎间盘退变及髓核突出过程中可产生大量 炎症介质，是引发疼痛刺激的主要因素，白介素一18(Il一18) 大鼠L3—4椎间盘，保留临近椎间盘的终板和椎体骨，在4％ 和白介素一1p(IL一1$)作为椎间盘炎性反应的始动因子之一， 可上调中性粒细胞趋化因子(MCP一1)的表达，吸引中性粒 细胞及淋巴细胞侵润，促使髓核内软骨细胞成分分泌其他促 炎因子IL一8、IL一6、成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管 行蜡块和玻片的制作。椎间盘组织在95％酒精中浸泡1小时， 内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMPs)、黏 无水酒精中20分钟2次，二甲苯中浸泡20分钟，浸蜡30分 附趋化因子以及前列腺素E(PGE)和环氧化酶(COX)等【4】。 钟，包埋。在石蜡切片机上切片，切片厚10微米，切片后置 因此，本研究参考既往研究基础，主要观察手法对IL一18和60度恒温烤箱中烤片2小时，使组织紧密粘附于玻片。每块 IL_1p在椎间盘炎症反应过程中表达的影响。 组识随机取连续切片多张，分别行苏木素一伊红染色。染色 材料与方法 后酒精脱水，中性树胶封固。 6、免疫组织化学染色及免疫荧光染色：①石蜡涂片