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第六届中国冷冻冷藏新技术新设备研讨会论文集
慢速冷却过程中胞外冰晶对悬浮和
贴壁细胞的影响
诸凯 王雅博 梁飞 刘斌 苏新军
天津商业大学天津市制冷技术重点实验室
摘 要 优化细胞的保存方法了解细胞在慢速降温过程中受到的损伤机制及低温保护剂的保护机制非常
重要本文分别以贴壁和悬浮状态下的人胚肾上皮细胞为对象根据相平衡状态图模拟未冻结通道
内的液体状况设计不冻结实验并与冻结实验对比定量研究溶液效应和冰晶的机械挤压对细胞的损
伤应用甘油作细胞冻存保护剂通过改变 溶液的初始浓度获得与甘油 溶液降温至某一温度
相同的未冻结分数和 浓度定量研究甘油对机械损伤的保护机制结果显示当温度 胞外
冰晶引起的机械损伤是造成细胞死亡的主要原因而随着温度的降低多数细胞死亡是由于溶液效应造成
贴壁细胞与悬浮细胞相比较前者更容易受到胞外冰晶引起的机械性损伤
关键词 胞外冰晶悬浮细胞贴壁细胞低温保护剂细胞损伤
慢速降温过程中细胞损伤机制的定量研究 面细胞依靠自身分泌或培养基中提供的贴附因子
对于成功保存生物组织意义重大生物材料的低 才能在该表面上生长与繁殖贴壁细胞的生物学特
温保存是将细胞组织等置于含有低温保护剂的溶
性与细胞悬液中的单个细胞有所不同 因此在对
液中进行降温关于低温保存中的损伤机制研 细胞低温保存的研究中有必要了解和研究贴壁粘
究人员进行了大量的研究 提出著名
附细胞在低温保存过程中的损伤机制
的两因素假说 过快冷却形成胞内冰损伤
另外 等 通过低温显微镜观察慢
过慢冷却引起的溶液损伤 和
速冷却过程证明低温保护剂的加入能够改变胞
等通过对慢速降温保存的进一步研究指
外冰晶的形态和结构有效降低冰晶对细胞的机
出胞外冰晶在生长过程中与细胞相互间的机械
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