血清氧化性修饰载脂蛋白B的新法测定.pdfVIP

维普资讯 … ．、 患 M学E学DC批1N中A文ENA 。 第i9Jg66卷年第95月划 f占 血清氧化性修饰载脂蛋 白B的新法测定 陈 琪 陈丙莺 陈秀英 王 南 · ． (『京 百 E 他研究中心，南 0。2g) 牛牛r／ 弓占2r 摘 要 4 脏 烯醛fHNE)是脂磺过氯化反应的 个亘婴产物 ；本文报告埘酶联免疫法检 测人皿清越脂 B(apoB)J怕 HNE抗 决定簇 的 J水平 发珊到性 的 l￡均水 。卜(I56．5mg／L． 157)高下且fl{(I176mg／L 一i06)， 70岁 l迁随 一『齿々 增高 。apoB}HNE抗原挑定簇的 表达 i 清铁篮 禽址呈rI扣关，还与m消总Ⅲl间fj{[、l=f锕三酯以及低街度情磺臼胆固醇水平呈正 l{l『关．与高密艘脂蛋门 闹醇水、呈负相关 槛示本法可作为橙洲血清肫厦过氧化反应的一个有用 指标 。 ． 关键词!登堑王堑； 量堡；瞬畦免疫洼 R镊 白B ELI／sA 中图法分类号 R365．5 脂蛋 白中 自由基介导的脂质过氧化反 6000沉 淀法 删定 ，低 密度脂 蛋 白胆 固醇 应与动脉粥样硬化有密切联系，正愈来愈受 (LDI )刚根据 Friedewald公式算出。血清 到广泛重视 。检测血清脂质过氯化反应的方 铁蛋 白含量 由酶联免疫吸附试验删定 ’J，溶 法很多，最常见的是用硫代巴比妥酸反应物 液光密度值 由酶联检}l!11仪 (华东 电子管厂) (TBARS)法测定脂质过氧化反应 的一些醛 读取 。 类 中间产物 ．如丙二醛 (MDA)等。近年来有 血清 apoB上的 HNE抗原决定簇 的测 人开始应用免疫法检测血清 巾MDA修饰的 定系酶联双抗体夹心浩 。羊抗人 apoIj抗体 低密度脂蛋 白(MDALDL)和氧化 LDL的 自 (金陵医院生化科)经 50mmol／L碳酸盐缓 身抗体 ，结果发现动脉粥样硬化患者血清中 冲液 (pH9．6)稀释至 5rag／L，包被于 40孔 的 自身抗体高于正常对照 。 。本研究则尝 微孔板中，每孔 200uI，4C孵育过夜 。次 日用 试应用能识别脂质过氧化反应的另一重要 舍 0．05 吐温 20的磷酸 盐缓 冲液 (PBS， 产物 4羟基壬烯醛 (HNE)抗原决定簇的 pH7．d)洗涤 3遍 ，每孔再加 250pl封 闭液 抗 ，直接 检测血清 中含载脂蛋 白B(apo 37C 孵 育 1小 时 。封 闭液 为 50mmol／L B)脂蛋 白上 的 HNE抗原决定簇含量 ，现将 NaHPO．·2HO，含 0．5 牛 血 清 白蛋 白 结果报告如下。 (BSA)和 6 山梨醇 。所用的检测抗体为兔 抗 HNE抗原决定簇抗体，该抗体不能识别 1 材料和方法 天然未修饰 LDL，但与 HNE—LDL、Cu 介 导 收集隔夜空腹人血清进行血脂测定 ，其 的体外氧化 LDL有交叉反应性 将各 l00 余血清置一20C冻存 ，留作检 剐 HNE抗原 ul的待测血清和检测抗体加至微孔中，37C 决定簇 ，存放期不超过 1个月。血清总胆 固