乙型肝炎病毒B、C基因与临床关系的探讨.pdfVIP

乙型肝炎病毒B、C基因与临床关系的探讨 朱琪1 江家骥2‘ 郑松龄3 黄祖雄4柯坤宇4胡盈莹4 郭锡麟4 摘要：目的：探讨HBV基因型与肝脏组织学及其临床的关系。方法：对在福州市传染病院就诊 的114例慢性乙肝患者进行肝活检及病理组织学检查，乙肝“两对半”、HBV—DNA、ALT和AST检测， 对其中的74例进行血清基因型检测。结果：74例患者分别为B、C基因型(分别为38例与36例)。两 组基因型比较：①在炎症分期及纤维化分级上差异无显著性；②在肝组织各部位纤维化程度的比较中， 仅小叶内纤维化程度比较差异有显著性；③临床和病理诊断符合率类似；④HBV—DNA两型间差异有 因型的HBV—DNA差异有显著性，而肝脏组织学改变、ALT、AST和HBeAg的差异无显著性。 关键词：乙型肝炎；基因型；病理诊断；临床诊断 人类感染HBV基因型别可能与疾病的预后有相关性，但HBV基因型与肝脏组织学及临床的关系 尚不清楚。为此，我们对2002—2003年在我院就诊的114例乙型肝炎患者行肝活检及病理组织学的 肝炎病毒B、C基因型与临床的关系。 l材料与方法 1．1 病例来源2002至2003年12月在我院就诊慢性乙型肝炎者，行基因学检测的74例中，男 乙肝轻度15例，慢乙肝中度47例，慢乙肝重度10例，肝硬化2例。 1．2方法 1．2．1基因分型用PCR—RFLP法进行，取血清1001xl，加201．d10x抽提Buffer(5％SDS，0． 1mol／LEDTA，0．1mol／L 后，常规酚和氯仿法抽提。 TTC’TrG GGGTIT 设计针对S基因区的引物对YSl(5’一GCG GGGACTCAAGATGATGTrGTA 片段长度为585bp。 选择不同的限制性内切酶(St)rI、BsrS I)对71xlPCR产物进行组合平行酶切。切反 I、HpalI、Dpn 应总体积15p,l，温度依各酶而定，产物经3％琼脂糖凝胶电泳分离鉴定。不同HBV基因型的酶切结果 判断见参考文献【2J。 将无法通过PCR 件分析明确其基因型。测序工作由上海生工生物有限公司完成。 1．2．2肝组织检测方法肝活检标本均采用10％福尔马林固定，按常规方法进行脱水、石腊包埋、 切片，常规HE染色、胶原纤维V．G染色、网状纤维Gomori’s染色和免疫组化二步法(采用北京中山试 66 体。肝脏炎症活动度及肝纤维化的计分标准见表1。 表l肝组织炎症活动度及纤维化程度计分 0 无 无 无 无 无 无 无 1 部分汇管区 变性及少数 局限PN 偶见BN 局限、少数 扩大无隔6／10ram细 少数炎细胞浸润点状坏死 主为P—P 6／10mm 2 弥漫、多数 扩大有隔 疏松、宽 3 多数汇管区 多数坏死灶 多数汇管区 少数BN 肝硬化 肝硬化 致密、宽 较多炎细胞浸润 PN达周长50％ 4 汇管区扩大 坏死灶PN广泛 BN范围广 炎细胞集聚 融合成片 周长50％小叶结构失常 一 一 ≥2／3 活检面积 淋巴细胞形成 深达小叶中带或多小叶坏死 2结果 2．1 乙肝基因型与肝脏组织学的关系 B、C基因组与肝脏组织学炎症活动度分级及纤维化分级 527)，见表2；小叶内纤维化程度差异有显著性，见表3。 2．2不同基因型l临床与病理诊断比较经秩和检验，B与C型f|缶床与病理诊断比较，差异无显 表2不同甚因型肝脏组织学炎症活动度及组织学纤雄化分级 肝组织炎症活动度(计分，X±s)