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金黄色葡萄球菌的检验 金黄色葡萄球菌的概述 金黄色葡萄球菌 (Staphyloccocus aureus Rosenback) 是人类的一种重要 病原菌，隶属于葡萄 球菌属（Staphylococcus） 可引起多种严重感染。 主要生物学特性 3.生化反应 可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶，触酶阳性。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，耐干燥，对磺胺类药物敏感性低，对消毒剂不敏感。但对青霉素、红霉素等高度敏感。 主要生物学特性 5、致病性 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭酶：a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死；b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；  c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C1、C2、C3、D、E及F八种血清型。肠毒素可耐受100℃煮沸30分钟而不被破坏。它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。 流行病学 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。 流行的特点 季节分布：多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。 上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。 污染食品的途径：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒； 熟食制品包装不密封，运输过程受到污染； 奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。  实验目的 掌握金黄色葡萄球菌基本检验的程序。 熟悉金黄色葡萄球菌检验的方法与步骤。 掌握金黄色葡萄球菌主要的生物学特征。 掌握微生物无菌操作技术。 检验程序 结果观察 1、 金黄色葡萄球菌溶血现象 2、 普通营养琼脂平板上菌落形态 3、 接种KIA 4、 革兰染色镜检 5、 生化鉴定 * 2009.11.10 主要生物学特性 1、形态染色 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列单个或成对和成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。 2、培养特征 金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度30~37°C，最适生长pH 7.4。 平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1~2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。 待检标本 于7.5%NaCl或胰酪胨大豆肉汤增菌液 37 ℃培养 血平板和Baird-parker划线分离 增菌 分离培养 纯培养 确证试验 血浆凝固酶试验 甘露醇试验 观察菌落特征，革兰染色 琼脂斜面和肉汤培养基 耐热核酸酶试验 肠毒素测定 KIA斜面37℃16～20h