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绿竹笋外壳外切型HNAase及内切型ENGase之纯化与性质研究.pdf
綠竹筍外殼外切型 HNAase及內切型 ENGase 之純化與性質研究
指導教授張珍田： 日期 ：94/11/10
時間 ：8:30AM
學 生：吳雅瑛 地點 ：格 106
摘要
外切型 β-N- 乙醯胺 基六碳 糖苷酶 ( β-N-acetylhexosaminidase, EC 3.2.1.52 ；HNAase)
和內切型 β-N- 乙醯胺 基葡 萄醣苷酶 （Endo- β-N-acetylglucosaminidase, EC 3.2.1.96 ；
ENGase ）在醣類結構分析和衍生物合成在生物技術上具有應用價值。此二酵素與植物
成熟發育與防禦機制亦有 密切關係 。本研究旨在分離純化綠竹筍外殼所含 外切型
HNAase及內切型 ENGase 並探討其性質及可能應用。首先將綠竹筍外殼經冷凍乾燥研
磨成粉末 ，然後經緩衝液萃取 、硫酸銨劃分 、膠體過濾層析 、製備式等電焦集電泳及
離子交換層析等系列步驟純化外切型 HNAase及內切型 ENGase ，以獲得均質純度的酵
素。最後 分析純化酵素之生化學性質如分子量、等電點、動力學參數 、基質特異性和
催化機制 以及在寡糖水解和合成上之可能應用。
參考文獻:
1.Yoshinobu, K., Toshihiko, T., Akira, O., Hiroshi, T. ＆ Yukio, I. (1998) Enzymatic
properties of endo- β-N-acetylglucosaminidases from developing tomato fruits and soybean
seeds ：substrate specificity of plant origin endoglycosidase. Biochim. Biophys. Acta.
1381:27-36.
2.Yu-Lan, J., Yu-Young, J., Kil-Yong, K., Jae-Han, S., Yong-Woong, K. ＆ Ro-Dong,
P. (2002) Purification and Characterization of β-N-acetylhexosaminidases from Rice
Seeds. J. Biochem. Mol. Biol. 35:313-319.
探討綠藻水萃取物對血癌細胞(WEHI-3 cells)生長之影響
指導教授 :周淑姿 日期 : 95/11/10
時間 : 8:30 AM
學 生 :黃佳進 地點 : 格 106
摘要
研究指出綠藻 (Chlorella) 具有抗氧化與抗腫瘤功效 ，但鮮少對 Balb/c 小鼠血癌
細胞(WEHI-3 cells) 生長之影響做探討。因此本研究擬 探討綠藻水萃取物(GPW) 清除
DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)自由基 之效力及 其對WEHI-3細胞生長之影響；細
胞模式以 MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 分析GPW
對WEHI-3細胞存活率 、流式細胞儀分析細胞週期變化 、倒立式顯微鏡觀察細胞型態 、
DAPI (4,6-diamidino-2-phenylindole) 染色觀察細胞核損傷 、慧星試驗法觀察細胞 DNA
損傷及利用西方點墨法分析細胞週期調控蛋白 、凋亡調控蛋白之表現 ，以評估 GPW
誘導 WEHI-3細胞凋亡之路徑 。初步結果顯示綠藻水萃取
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