共同学生物化学之核酸和酶.pdfVIP

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共同学生物化学之核酸和酶.pdf

第二节 核酸的结构与功能 一、核酸的化学组成及一级结构 (掌握) 核酸在核酸酶作用下水解成核苷酸,而核苷酸完全水解后释放等量摩尔的碱基、戊糖和磷酸 DNA 的基本组成单位是脱氧核苷酸,而RNA 的基本组成是核苷酸 (一)核苷酸是构成核酸的基本组成单位。 核苷酸可分为核苷一磷酸(NMP )、核苷二磷酸(NDP )、核苷三磷酸(NTP ),磷原 子分别标以α、β、γ加以区分。 (二)DNA 是脱氧核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连接而成的大分子。 产生一个由多个脱氧核苷酸构成的、具有方向性的线性大分子,称为多聚脱氧核苷酸 (DNA ) (三)RNA 也是具有3’,5’-磷酸二酯键的线性大分子。 (四)核酸的一级结构是核苷酸的排列顺序。 核苷酸与脱氧核苷酸的排列顺序和书写顺序必须是从5’-末端到3’-末端。 二、DNA 的空间结构与功能 (掌握) (一)DNA 的二级结构是双螺旋结构。 1.DNA 双螺旋结构模型的要点。 ①DNA 是反向平行、右手螺旋的双链结构 直径2.37nm,螺距3.54nm 。表面存在一个大沟和一个小沟。 ②DNA 双链之间形成了互补碱基对。 每个螺旋有10.5 个碱基对,每两个碱基对之间相对旋转角度为36 度, 每两个相邻的碱基对平面之间的垂直距离是0.34nm ③疏水作用力和氢键共同维持着DNA 双螺旋结构的稳定 2.DNA 双螺旋结构的多样性。 (二)DNA 的高级结构是超螺旋结构。 (三)DNA 是遗传信息的物质基础。 一个生物体的基因组是它的全部遗传信息,即DNA 的全部核苷酸序列。 有些病毒的基因组是RNA 三、RNA 的空间结构与功能 (掌握) (一)mRNA 是蛋白质合成的模板。 1.大部分真核细胞mRNA 的5’末端都是以7- 甲基鸟嘌呤-三磷酸核苷为起始结构。 2.在真核生物mRNA 的3’末端,有一段由80~250 个腺苷酸连接而成的多聚腺苷酸结构, 称为多聚腺苷酸尾或多聚A 尾。 3’-多聚A尾结构与 5’-帽结构共同负责mRNA从核内向细胞质的转位、维系mRNA的 稳定性以及翻译起始的调控。 3.mRNA 依照自身的碱基顺序指导蛋白质氨基酸顺序的合成,也就是为蛋白质的生物合 成提供模板。 起始密码子为AUG ,开放阅读框(ORF) 4.mRNA 的成熟过程是hnRNA 的剪接过程 (二)tRNA 是蛋白质合成的氨基酸载体。 所有的tRNA 具有以下特点: 1. tRNA 含有多种稀有碱基 m 除含有A 、C、G、U外,还含有双氢尿嘧啶(DHU )、假尿嘧啶核苷和甲基化嘌呤( G、 mA )等,稀有碱基均是转录后修饰而成的 2. tRNA 具有茎环结构 3. tRNA 的3’末端连有氨基酸 所有的tRNA 的3’末端都是以CCA结束的。 4. tRNA 的反密码子能够识别mRNA 的密码子。 四、核酸的理化性质 (掌握) (一)核酸分子具有强烈的紫外吸收。 在中性条件下,最大吸收值在260nm,常以 A260=1.0 相当于50ug/ml 双链DNA、40ug/ml 单链DNA 或RNA 以及20ug/ml 寡核苷酸为计算标准。 纯DNA 样品的A260/ A280=1.8;而纯RNA 样品的A260/ A280=2.0 (二)DNA 变性是双链解离为单链的过程。 DNA变性只改变其二级结构,不改变它的核苷酸序列。 DNA 的增色效应是检测DNA 双链是否发生变性的常用指标。 DNA 的解链稳定或称融解温度 (三)变性的核酸可以复性或形成杂交双链。 退火、核酸分子杂交 五、核酸酶(了解) 第三节 酶 一、酶的分子结构与功能 (掌握) 单体酶、寡聚酶、多功能酶或串联酶 (一)酶的分子组成中常含有辅助因子。 单纯酶:脲酶、一些消化蛋白酶、淀粉酶、酯酶、核糖核酸酶 结合酶分为蛋白质部分(酶蛋白)和非蛋白质部分(辅助因子); 全酶:只有全酶才有催化作用 金属酶指金属离子与酶结合紧

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