分光光度法及色谱法.pptVIP

第二章 分析数据的处理和分析工作质量保证 第三章 紫外—可见分光光度法 光子的能量与波长的关系为： 一、显色反应条件的选择 偏离L—B law引起的误差 根据Beer定律，当液层厚度一定时，测得的吸光度与吸光物质的浓度之间应为线性关系，且直线过原点。 当A—c直线发生弯曲 或不通过原点时，则 称为偏离Beer定律。 造成偏离的原因很多，主要原因如下： 1. 待测组分浓度过高 因此，为了减小测量误差，通常将吸光度控制在0.1～1.0范围内。 第四章 原子吸收光谱法 第二节 基本原理 一、原子吸收光谱的产生 四、积分吸收与峰值吸收系数 第三节 原子吸收分光光度计 原子吸收分光光度计类型很多，其基本结构相同，主要由光源、原子化系统（类似于吸收池）、分光系统、检测系统和显示系统五部分组成。 第四节 干扰及其消除 第五章 分子荧光分析法 一、荧光的产生 二、激发光谱和荧光光谱 （一）荧光的检测 （二）激发光谱与荧光光谱的形成 任何荧光物质，都具有两种特征光谱，即激发光谱(excitation spectrum)和荧光发射光谱(fluorescence emission spectrum)。 三、影响荧光产生及荧光强度的因素 （一）物质产生荧光的必要条件 第二节 定性定量分析 一、荧光强度与溶液浓度的关系 第三节 仪器 一、仪器的构造及原理 第一节 基本原理 一、化学电池（Chemical cell） 2. 原电池表示方法 三、能斯特（Nernst）方程 四、液接电位和盐桥 第二节 直接电位法 一、电位分析法原理 二、参比电极 参比电极（reference electrode）是指在温度、压力一定的条件下，其电极电位准确已知，且不随待测溶液中离子浓度的改变而改变的电极。要求参比电极的结构简单、使用方便，电极电位的重现性和稳定性好。SHE是最准确的参比电极，但由于它使用起来不方便，所以一般不用。常用的参比电极是饱和甘汞电极和银－氯化银电极。 （二）银/氯化银电极 三、指示电极—离子选择性电极 指示电极（indicate electrode）是指电极电位随待测离子活度（浓度）的变化而变化，并且符合能斯特方程的电极。这一特性也称为电极对待测离子呈能斯特响应。按其电极电位产生机理的不同，指示电极分为两大类：基于电子交换的氧化还原电极和基于离子交换的离子选择性电极（ion-selective electrode ISE）。 （二）离子选择性电极的电极电位 离子选择性电极的电极电位?ISE主要由两部分组成：内参比电极电位和膜电位 （二）比较法 第九章 液相色谱法 第一节 色谱法概述 一、色谱法分类 （二）按分离机理分类 （三）按固定相的形状分类 二、色谱分离及原理 （三）色谱法的几个基本参数 第二节 液相柱色谱法 液相柱色谱法按分离机理的不同，可分为吸附柱色谱、分配柱色谱、离子交换柱色谱和凝胶柱色谱。 一、吸附柱色谱法 吸附柱色谱法，又称为液固色谱法，是以固体吸附剂为固定相。Tswett分离植物色素的方法就属于此类色谱。 （一）分离原理 吸附剂通常是多孔的固体颗粒物质，在它的表面存在分散的吸附中心。吸附色谱的实质就是根据组分在吸附剂上吸附能力的不同来进行分离。 当流动相（m）进入色谱柱后，它便以单分子层形式被吸附剂表面吸附中心吸附。当试样被流动相带入柱后，在迁移过程中，在吸附剂表面将发生组分分子（X）取代固定相（s）上流动相（溶剂）分子（M）的反应，也称竞争吸附。 （二）固定相 吸附柱色谱所用固定相为吸附剂，吸附剂是决定组分K值大小的主要因素之一。要选择适当的吸附剂并对其进行适宜的处理，首先应对其性能有所了解。 （三）流动相 二、分配柱色谱法 分配柱色谱法的流动相和固定相均为液体，故又称为液液分配色谱法，简称液液色谱。 第三节 平面色谱法 平面色谱法（planar chromatography）又称平床色谱法是将固定相涂铺在平面载体上，用溶剂把试样展开而分离的一种液相色谱法。它包括薄层色谱法和纸色谱法。 一、薄层色谱法 薄层色谱法是在柱色谱和纸色谱基础上发展起来的分离分析技术。按分离原理不同，它可分为吸附、分配、离子交换及凝胶色谱等类型。应用最多的是吸附色谱，下面介绍其原理及操作技术。 （一）方法原理 将固定相（吸附剂）均匀地涂铺在表面光洁的玻璃、塑料或铝铂上制成薄层板，把待分析试样点加在薄层板一端的起始线上（称为点样），然后放入密闭容器