分光光度法有用的.docVIP

分光光度法是一种简单、快速、经济的定量分析方法,在化学和临床实验室的定量分析中得到了广泛的应用,其中单波长分光光度法是最简单的分析方法,但单波长分光光度法一般只能测定单一组分的含量 分光光度法是最基本,最常用的分析化 学方法之一,在环境监测及其他各行各业的 化学分析中应用颇多。分光光度法的实用技 术除了经典的热力学和动力学方法之外.随 着分析仪器性能的改良.尤其是计算机的应 用,建立了许多新的分析技术和方法,为提高 信噪比.改善选择性,简化操作条件、进行多 组分同时测定等提供了良好的条件。这些方 法大致可分为两类:一类主要借助于仪器的 输出信息,常用的有双波长分光光度法,三波 长分光光度法,导数分光光度法等;另一类是 利用计算数学和统计学的方法(或称化学计 量学,Chemometries),应用较多的有最小二 乘法、线性回归法,因子分析法,卡尔曼滤波 法、偏最小二乘法.全光谱定量法等。本文仅 就上述两类常用方法及其在环境监测中的应 用进行简单的叙述。 1仪器信息方法 1.1双波长分光光度法 双波长分光光度法包括双峰双波长法、 等吸收双波长法和K系数(系数倍率)法等, 其中后者最为常用。该方法可以提高灵敏度 和精确度[1.2],又比较简单,所以被广泛应用。 双波长法的关键是要选择合适的工作波 长对,使得干扰组分的△A值为零.但波长间 隔要合理,以减少仪器响应,样品散射和放射 等影响,尤其对于混浊样品,最好在可见光区 测量,且△入(40一60)nm之l司为宜。对于K 系数法,K值不宜过大,以避免实验误差的放 大。目前,多用计算机选择最佳工作波长对, 提高了方法的精确度,并有可能选择适当的 波长和K值,使之用于三组分体系[3」。双波 长法除使用双波长分光光度计外,也可使用 普通的单波长仪器。 1.2三波长分光光度法 三波长分光光度法是基于能在干扰组分 吸收光谱上找出位于一条直线上的三点,然 后经过一系列运算使干扰组分的△A值为 零,从而消除干扰。与 双波长分光光度法相比,三波长法对于消除 由于样品混浊而产生的散射影响更为有效。 1.3导数分光光度法 计算机的应用大大拓宽了分 光光度法的适用范围, 提高了方法的选择性、 灵敏度及精确度。 导数分光光度法[12〕分辩重叠光谱带和 消除背景干扰的能力较强,因此既可用于定 性分析,也可提高定量分析的选择性,应用范 围十分广泛。导数光谱的分辩能力随导数阶 数的增加而提高,但在通常情况下,由于光谱 噪声的存在,增加导数阶数会使信噪比降低, 增大微分波长差△入有助于提高信噪比,但达到 一定程度后,由于偏离效应,此优越性被削弱。 近年来应用双波长K系数法原理提出 的组合导数分光光度法「13〕,可以解析普通 导数光度法难以解析的重迭谱带,进一步提 高选择性和灵敏度,拓宽了导数分光光度法 的应用范围 - 1