分光光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基.pdfVIP

第28卷第2期 成都大学学报(自然科学版) 。V．01．28No．2 of 2009年6月 JournalChengduUniversity(NaturalScienceEdition) Jun．2009 文章编号：1004—5422(2009)02—0091—04 分光光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基 颜 军，苟小军，邹全付，纪小明，崔秀英，兰海蓉，李 雪 (成都大学中药化学实验室，四川成都610106) 摘要：基于水杨酸可以捕获羟基自由基(·OH)生成2，3一二羟基苯甲酸和2，5一二羟基苯甲酸，在波长510 咖处有最大吸收的原理，建立一种用分光光度法检洲F砷uan反应产生的羟基自由基(·OH)的方法．通过对反 应体系影响条件的优化。筛选出最佳反应物配比和最佳实验条件，并对其稳定性进行检测．在此基础上．测定抗 氧化剂对羟基自由基(·0H)的清除率．结果表明：该体系反应灵敏、稳定性高，可作为抗氧化剂的筛选方法之 一‘ ” 关键词：Fenton反应；羟基自由基；分光光度法；水杨酸 中图分类号：∞∞ 文献标识码：A 计，恒温水浴锅等． 0引言 本实验所用材料为：银耳多糖(本实验室自行提 研究表明，自由基是引起人类衰老和许多疾病的 取)，所用试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水． 重要因素，例如癌症、多发性硬化症、帕金森疾病、免疫 1．2溶液的配制 系统疾病等【lJ．羟基自由基(·OH)是人体内最主要的自 FeS04溶液(1．8 由基，其消除率是反映药物抗氧作用的重要指标．由于 0．2736 g，用水定容于100mL容量瓶中，使用时稀释 羟基自由基(·伽)的反应活性大、寿命短(小于10～s)、 9倍． 存在浓度低，因此在有关羟基自由基(·OH)的研究中， 其分析测试方法就显得特别重要【l刻． mL，用水定容于100mL容量瓶中． 目前，检测羟基自由基(·OH)的方法主要有，电 水杨酸一乙醇(1．8 n呦VmL)：称取水杨酸固体 子自旋共振法(ESR)、化学发光法、高效液相色谱法 0．2486 mL容量瓶中，使用 g，用无水乙醇定容于100 (I-IPLE)等b-7J，这些方法多数为间接测定方法，且 时稀释9倍． 仪器特殊，试剂昂贵，使其应用受到一定的限制．在 水杨酸一水溶液(1．8 mol／mL)：称取水杨酸固 几种常用的羟基自由基(·OH)检测方法中，分光光体0．2486 mL容量瓶中，使用时 g，用水定容于100 度法较高效液相色谱法和电子自旋共振法简便、直 稀释9倍． 接，且由于其所需设备简单，可供一般实验室检测使 水杨酸一乙醇一水：水杨酸一乙醇与水的比例 用．而被广泛采用． 为l：3． 本实验采用可见分光光度法，以水杨酸作为Fen． 1．3羟基自由基(．OH)的测