中国雨蛙精子结构及其在系统发育上的意义.pdfVIP

维普资讯 ?5 2D[弓 动 物 学 研 究 1999，Jmt．2oc3)：161～167 CN53—1040／0 1SSN02$4一鼹53 咄 _l 一 中国雨蛙精子结构及其在系统发育上的意义 林丹军 尤永隆 钟秀容 —--一 (福建师范大学生物工程学院 福州 350007) (福建医科大学电镜室 福州 350004) 摘 要 研究了中国雨蛙 (H妇 chinensis)精于的超微结构，并初步探讨其在系统发育上的意义。中国雨 蛙精于由头部和尾部两部分组成。头部有一棒状的细胞核，核内染色质高度浓缩。细胞核前方有顶体 顶体圆 锥状。顶体下腔之中有一圆锥状的顶体下锥和细小的囊泡。精子尾部细长，主要 由轴丝、致密纤维和线较体组 成。尾部没有波动膜。从蟾蜍科、雨蛙科和蛙科的精子结构看，无尾两栖类在进化过程 中，精于结构趋向简 单 雨蛙科精于的结构介于蟾蜍科和蛙科之可『，更接近蟾蜍科。在雨蛙科中，与已经研究过的雨蛙科的其他种 类相比，中国雨蛙的精于结构较为简单 ，因此似更为高等。精子尾部波动媵的消失和附属纤维数量的减少似可 认为是中国雨蛙的进化特征之一。 e7 乡 荸中豳!分类一号{嗵e婪59，!!，塑塑竺塑t．至塾通 ． 53口- 自70年代 以来，国外在无尾两栖类的精子结构 1．2 超薄切片标本音勺制备 方面有较多的研究报道 (Jamie~on等 ，1993)，而在我 ①将精巢切成 lmm 大小的组织块 。置 2．5％ 国这一方面的研究却不多见 在无尾两栖类中，蟾 戊二醛中，4℃过夜备用；②将精巢置小培养皿中， 蜍科精子的尾部有波动膜，而蛙科精子的尾部没有 按每对精巢加 0．05mL蛙生理盐水 的比例加人生 波动膜 (Burgos，1956；Poitier等 ，1971；Swan等 ， 理盐水，捣碎精巢，再加人等量的5％戊二醛，双 1980；莫慧英，1985)。在分类学上，雨蛙科和蟾蜍科 层尼龙滤布过滤。滤液经 3500r／rain离心 5min， 同属于前 凹型亚 目。雨蛙精子的结构特点是否也类 弃去上清液，往沉淀物中加人等量的 15％牛血清 似于蟾蜍精子，应是一个饶有兴趣的问题。国外已 白蛋 白溶液，搅 匀，然后 小心地在上方铺 盖上 有雨蛙科某些种类精子结构的报道 (Jamie~on等， 2．5％戊二醛，4℃过夜，弃去戊二醛，沉淀物保存 1993；Rastogi等，1988)，但是未见有关中国的雨蛙 4℃备用 ；③上述两种经戊二醛固定 的样 品以0．1 种类的报道。本文研究中国雨蛙 (Hya／chinensls) mol／L的PBS漂洗，1％锇酸后固定，各级乙醇脱 精子的超微结构，并与蟾蜍科、蛙科及雨蛙科其他种 水，Epon812树脂包埋。切片经醋酸铀和柠檬酸 类的精子结构进行比较，初步探讨了其在系统发育 铅染色后，置JEOL，JEM—l200EX型透射 电镜 上的意义 观察。 1．3 精子尾部各段的横切面计数 1 材料和方法 在透射电镜放大倍数为 2万倍下观察标本，随 1994年至 1996年的每年 5月，从福州郊区鼓 机选取若干个视野，分别计算每个视野中精子尾部 岭共捕捉到 48只雄性中国雨蛙，剖腹取出精巢 ， 中段、主段和末段的横切面数。计数过的视野不再 用蛙生理盐水洗涤后备用。 重复计数。 1．1 光学显徽镜