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植物细胞工程与动物细胞工程的比较
植物细胞工程的技术手段主要有植物组织培养和植物体细胞杂交,其中植物组织培养是植物细胞工程的基础;动物细胞工程的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植和核移植,其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。动、植物细胞工程的原理和技术手段有相似之点,但也存在不同之处,现对两者的主要技术手段加以分析比较:
一、植物细胞的组织培养与动物细胞培养
1.过程
⑴植物组织培养
⑵动物细胞培养
2.两者的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 区
别 原理 植物细胞的全能性 细胞增殖 培养基 固体或半固体培养基,包括矿质元素、蔗糖、维生素、有机添加物、植物激素等 液体培养基,包括无机盐、葡萄糖、维生素、氨基酸、动物血清等 培养条件 再分化阶段需光 不需光 细胞来源 离体植物器官、组织或细胞 胚胎或幼龄动物组织、器官 结果 获得新个体或细胞产品 大量产生细胞或细胞产物 用途 ①快速繁殖名贵花卉和果树
②培养无病毒植株、转基因植物
③大规模生产细胞产品如药物、食品添加剂、香料、色素等 ①生产蛋白质制品如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等
②检测有毒物质
③研究药理病理
④移植治疗 相同点 ①都需要人工条件下的无菌操作,无菌培养
②都需要适宜的温度、pH等条件 二、植物体细胞杂交与动物细胞融合(单克隆抗体制备)
1.过程
⑴植物体细胞杂交:
⑵动物细胞融合(单克隆抗体制备):
2.两者的比较
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体制备) 原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前处理 酶解法除细胞壁(纤维素酶和果胶酶) 注射特定抗原免疫处理正常小鼠 促融方法 物理法:离心、振动、电刺激等
化学法:聚乙二醇(PEG) 物理法、化学法与植物原生质体融合促融方法相同
生物法:灭活的病毒 过程 第一步:用酶解法制备原生质体
第二步:用物理法或化学法促使原生质体融合
第三步:杂种细胞的筛选与培养
第四步:杂种植株诱导和鉴定 第一步:正常小鼠免疫处理
第二步:用物理法、化学法或生物法促使动物细胞融合
第三步:杂交瘤细胞筛选与培养
第四步:单克隆抗体的提纯 意义和用途 ①克服远源杂交不亲合的障碍,大大扩展杂交的亲本组合范围
②克服有性杂交的母系遗传,可获得细胞质基因的杂合子,研究细胞质遗传 ①制备单克隆抗体
②诊断、治疗、预防疾病。例如:
a.肿瘤定位诊断,放射性抗体→肿瘤
b.生物导弹治疗,抗体—抗癌药物→肿瘤 三、胚胎移植与核移植
1.哺乳动物的胚胎移植:指在体外完成受精作用和早期的胚胎发育,然后将早期的胚胎转移到母体的子宫发育。试管动物是指的体外受精和早期胚胎发育生物。试管牛的培育过程如下图所示:
2.核移植:核移植是动物克隆技术的基础。鲤鲫移核鱼的培育过程如下图所示:
值得注意的是:克隆多莉羊是把来自高度分化的体细胞的核移植到去核的卵细胞中形成的重组细胞培育而来的;
【例释1 植物细胞工程 动物细胞工程 技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养和融合 单克隆抗体制备等 特殊处理 酶解法去除细胞壁 胃蛋白酶处理制细胞悬浮液 融合方法 物理方法 化学方法 生物方法 物理方法 化学方法 生物方法 典型应用 无病毒植物的培育、人工种子、种间植物杂交等 单克隆抗体的制备等 培养基区别 所用的糖必须为葡萄糖 所用的糖为葡萄糖且动物血清不可缺少 A.0 B.1 C.2 D.3
解析:动物的组织块剪碎后只能用胰蛋白酶处理,而不能用胃蛋白酶处理;植物的原生质体的促融方法可用物理法或化学法,而不用生物法;植物组织培养的培养基中的糖用的是蔗糖,而不用葡萄糖。
答案:D
【例释2
A.图示“白菜—甘蓝”植株不能结籽
B.愈伤组织的代谢是自养需氧型
C.上述过程中包含着有丝分裂,细胞分化和减数分裂等过程
D.“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果
解析:白菜和甘蓝都是二倍体,它们的体细胞杂交后培育的“白菜—甘蓝”植株中有两个染色体组来自白菜,两个染色体组来自甘蓝,因此“白菜—甘蓝”属于异源四倍体,是可育的,能产籽;愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定型状态的薄壁细胞,不能进行光合作用制造有机物,因此愈伤组织的代谢类型是异养需氧型;上述过程包括去壁、原生质体融合、植物组织培养等过程,其结果是形成“白菜—甘蓝”幼苗,并未发育到性成熟个体,因此整个过程中有有丝分裂和细胞分化,没有减数分裂过程;任何性状都是基因选择性表达的结果。
答案:D
【例释3】下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
技术是单克隆抗
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