FTAPCR检测水源性隐孢子虫研究.pdfVIP

JSchistoControl ·71· 中国血吸虫病防治杂志2011年第23卷第1期Chin 2011，V01．23，No．I [文章编号】1005-6661(2011)01-0071-03 ·论著· FTA—PCR检测水源性隐孢子虫研究 张小萍，朱倩，何艳燕，江莉，蒋守富 [摘要] 目的建立FrA．PCR方法，并应用于水源中隐孢子虫污染的基因检测。方法用免疫磁珠(IMS)分离纯化隐 S 孢子卵囊，采用盯A卡提取隐孢子卵囊DNA，根据隐孢子虫18rRNA的基因序列设计引物，对模板DNA进行PCR扩 增，同时以刚地弓形虫、猪人肉孢子虫、细粒棘球蚴和华支睾吸虫等DNA样本作对照。用琼脂糖电泳和溴乙腚染色对 PCR产物进行检测。结果微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫和贝氏隐孢子虫均扩增出446 bp左右的DNA片段，其他对照 份黄浦江水、15份动物饲养场周边河水、9份污水处理厂出水和6份生活污水排污口水，分别检测出0、2、5、1份和1份共 9份阳性，阳性样品均扩增出约446bp的特异性片段。结论FIA．PCR可用于水样中隐孢子虫污染的基因检测。动物饲 养场周边河水受隐孢子虫污染程度较高。 [关键词] 隐孢子虫；卵囊；兀A-PCR；检测；水样 【中国分类号】R382．3[文献标识码】A Detectionof environmentalwater FTA- Cryptospordiumspp．in samplesby PCR ZhangXiao-ping，ZhuQian，HeYan-yan，肋，lgLi，舰Shou-fu DiseaseControland 200336，China ShanghaiMunicipalCenterfor Prevention，Shanghai Toestablisha chain indetectionof Objective reaction(FIA·PCR)methodCryptospordiumspp． [Abstract] f-l’A—polymerag semi in m‘differents讲珊esofwater．MethodsThe automated en· immunomagmetieseparation(IMS)ofCryptospordiumooeysts vironmentalwater Wag then DNAof WSSextractedFTAfilters samplesperformedfirsdy，andgenomie Cryptospordiumoocysts by were basedontheDNA ofthe18SrRNAfromC DNAwag disk．Ohgonueleotideprimersdesigned fragment gene parvum．Plate with inPC