嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的高效表达及其免疫原性.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( * # 年 月 $%%$ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-. $%%$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 嗜水气单胞菌外膜蛋白基因!# $% 的 高效表达及其免疫原性 谢俊锋 叶巧真 何建国 戴伟君 黄 晓 何鸣筱 陈 诚 （中山大学生命科学学院生物防治国家重点实验室，广州 !%$5 ） 摘 要 根据嗜水气单胞菌外膜蛋白基因 的核苷酸序列设计引物，运用聚合酶链式反应（ ）扩增出与预 (34 56 BCD 期大小相符的基因片段。将此基因片段克隆至质粒EDF92 G 的.+3HI 和 70( DI 位点，构建重组质粒，转化大肠杆 菌 （ ），经 诱导获得高效表达， 蛋白电泳表明在 处出现超强特异带，占总蛋白的 JK$! L9# IB2M FLF/BGM9 #6 16NL !O 。以+;/+2G/C(?PQR-S3 抗体进行T3US3V? W)(S 分析证明该#6 16NL 的蛋白为所表达的融合蛋白。纯化融合蛋白注 射雄性新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。9KIFG 和T3US3V? W)(S 检测结果显示，该抗体与表达的融合蛋白和从嗜 水气单胞菌中提取的#0 16 NL 外膜蛋白均呈阳性反应，表明所表达的融合蛋白仍保持原有外膜蛋白的免疫原性，为 此融合蛋白作为疫苗的候选成份提供理论基础。 关键词 嗜水气单胞菌，外膜蛋白 ， 基因，基因表达，免疫原性 X:E2F (34 56 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） Y50 G !%%%/#%0! $%%$ %#/%#%%/%4 嗜水气单胞菌（ ）普遍存在 自患病的濒死中华鳖，由中山大学生命科学学院寄 8%*(3($+ 29*(4#,+ ［］ 于土壤和水体环境中，一般认为是条件致病菌! ，可 生虫研究室保存。质粒载体： （ ， EDF92 G I?Z;SV(R3? 引起多种动物的败血症，对淡水养殖动物的危害尤 图 ），受体菌：大肠杆菌 、 （ ），均由 ! [K!/J)Q3 JK$! L9# ［］ 为严重$ 。此菌存在有多种血清型，随地域和宿主 香港大学动物系LV * F * , * C-? 惠赠。 的不同而有所差异，限制了灭活疫苗的使用范围。