离子交换层析复性重组人_干扰素折叠二聚体的形成.pdfVIP

( ) 　32 ( 1) : 10 1～105 , 2006 浙江大学学报 农业与生命科学版 Journal of Zhej iang University (A gric Life Sci) 文章编号 (2006) 0 10 10 105 γ 离子交换层析复性重组人 干扰素折叠二聚体的形成 1 ,2 1 1 靳 挺 , 关怡新 , 姚善泾 ( 1. 浙江大学 化学工程与生物工程学系 ,浙江 杭州 3 10027 ; 2 . 浙江大学 宁波理工学院生物与化学工程分院 ,浙江 宁波 3 15 100) γ 摘 　要 : SP Sep haro se Fast Flow 离子交换层析柱作为蛋白质复性系统 ,采用尿素梯度法进行重组人 γ 干扰素包涵体蛋白质的复性实验. 结果表明 ,尿素梯度离子交换层析法能有效地复性重组人 干扰素 5 - 1 γ 包涵体 , 复性后的重组人 干扰素的纯度达 95 % , 蛋 白收率达 54 % , 比活为 75 ×10 IU mg . 以 Sup er dex 75 凝胶作为体积排阻层析介质 ,对离子交换层析复性的样品进行分析 ,表明离子交换层析复 γ γ 性的样品中没有重组人 干扰素聚集体存在. 荧光光谱分析表明重折叠的重组人 干扰素的构象接近 于其天然二聚体构象. γ 关 　键 　词 : 重组人 干扰素 ; 包涵体 ; 复性 ; 离子交换层析 ; 荧光光谱分析 中图分类号 : Q5 11 　　　文献标识码 : A J IN Ting1 , 2 , GU AN Yixin1 , YAO Shanj ing1 ( 1. D ep a rtment of Chem ical an d B iochem ical Eng i nee ri ng , Z hej i ang Uni ve rs i ty , H ang z hou 3 1002 7 , Chi na ; 2 . Col leg e of B iochem ical Eng i nee ri ng , N i ng bo I ns ti t ute of Technology , Z hej i ang Uni vers i ty , N i ng bo 3 15100 , Chi na) γ Formation of dimers in ref ol ding of recombinant human interferon by ionexchange chromatography Journal of Zhej iang U niver sit y (A gric Life Sci) , 2006 ,32