基于CODEHOP克隆杉木种子14-3-3基因片段.pdfVIP

森 赫 姿 涠 培 _ doi：10．13360／j．issn．1000—8101．2015．01．004 中图分类号：Q781 基于 CODEHOP克隆杉木种子 ．一．5}基 因片段 李春映，仇伟，杨立伟，施季森，甄艳 (南京林业大学 林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室，南京 210037) 摘 要 ：对于未测序的物种，利用常规的引物设计很难扩增出蛋白质组获得的蛋白质基因。利用CODEHOP设计 杉木种子14-3-3蛋 白质的简并引物来进行反转录 PCR，从杉木未成熟的种子 中扩增出1000bp左右 的产物。将PCR产物构建pMD．19Vector载体上并转化JM109茵感受态细胞中，茵落PCR扩增测 序。结果显示，利用 CODEHOP方法设计简并引物扩增的 目标片段的大小及序列与预期的一致。 这将为杉木其他蛋 白质基因的克隆和研究提供参考。 关键词 ：CODEHOP；杉木；14-3-3蛋 白质 ；简并引物 Designdegenerateprim