miR-143下调肝癌细胞TLR2的表达并抑制肝癌细胞增殖和侵袭.pdfVIP

1076 细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmuno1)2014，30(10 · 论著 · 文章编号：1007—8738(2014)10—1076—04 miR·143下调肝癌细胞 TLR2的表达并抑制肝癌细胞增殖和侵袭 王 塬，逯忠堂，李尧清，纪 栋，张鹏飞，刘青光，姚英民 (西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科，陕西 西安 710061) [摘 要] 目的 探讨肝癌组织中小 RNA-143(miR一143)的表达 ，并通过瞬时转染肝癌细胞观察对癌细胞生物学行为的影响。 方法 收集肝癌组织标本及其对应癌旁组织，实时定量PCR检测miR-143在肝癌组织与对应癌旁组织中的表达情况；人工合 成寡义核苷酸miR．143mimics，体外瞬时转染HepG2肝癌细胞，MTr法检测细胞增殖变化，annexinV．F1TC／PI染色结合流式细 胞仪检测细胞凋亡变化，Ilr珊1sweU 侵袭实验检测细胞侵袭力变化，Westernblot法检测 Toll样受体 2(，ILR2)、核因子 KB (NF—KB)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及 MMP-9蛋 白表达情况。结果 miR一143在肝癌组织中低表达，通过转染miR．143 mimics上调 miR一143水平后 ，可以抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡、抑制肝癌细胞侵袭，并下调TLR2、NF—KB、MMP-2及 MMP-9表达。结论 miR一143在肝癌中低表达，肝癌细胞过表达miR一143可下调TLR2、NF-KB、MMP-2及MMP-9表达。 [关键词】miR-143；肝癌；增殖；侵袭；Toll样受体2 [中图分类号]R735．7，R392-33，Q279 [文献标志码]A miR-143 inhibitsproliferation and invasion ofhepatocellularcarcinomacellsv／a down—regulation ofTLR2expression WANGYuan，LUZhongtang，LIYaoqing，JIDong，ZHANGPengfei，LIUQingguang，YAOYingmin DepartmentofHepatobiliarySurgery，FirstAffiliatedHospital，MedicalCollege，Xi’anJiaotongUniversity，Xi’all710061，China 【Abstractj Obje~iye 30detecttheexpressionofmicroRNA-143(miR—l43)inhepatocellularcarcinomaandinvestigate whethertransfectino ofmiR-143couldinfluencethebiologiaclbehaviorsofhepatocellularac rcinomacells．M ethods Hepatocellular carcinomatissuesanditscorrespondingadjacentnormaltissueswereobtainedfrom patientsundergoingradicalsurgical resection．Real-timequantitativePCRwasutilizedtodetect therelativeexpressionofmiR-143inhepatocellularcarcinoma tissuesandocrrespondinga~acentnormaltissues．MiR-143mimicsandnegativecontrolo¨gonucIeotidesweresynthesized andtransfected intoHopG-2cells ／nvitro．Proliferation，apoptosisandinvasionofhtetransfectedcellsweremeasuredby M1_rassay，flowcytometry(FCM)ocmbinedwithannexinV—FITc／PIstaining，andTranswell assay，respectively．The proteinlevelsofT0II一¨kereceptor2(TLR2)，nuclearfactorkappaB (NFK·B)，m