石斛中联苄类化合物抗血管新生活性研究.pdfVIP

usHIZHENMEDIcINEANDMATERIAMEDIcAREsEARcH201lvoL．22No．4 时珍国医国药2011年第22卷第4期 石斛中联苄类化合物抗血管新生活性研究 沈凯凯1，徐蓓3，王磊3，杨 莉1，一，季莉莉1，2‘ (1．上海中医药大学中药研究所．中药标准化教育部重点实验室，上海201210； 2．上海中药标准化研究中心，上海201210；3．中国药科大学，江苏南京210038) 摘要：目的观察石斛中联苄类化合物对生长因子诱导人脐静脉内皮细胞(HuVEc)增殖的影响，探讨其构效关系。方 法M1tr法检测联苄类化合物对HUVEC静息期和生长因子刺激期增殖的影响。结果联苄类化合物抑制血管内皮生长 III；抑制碱性成纤维细胞生长 因子诱导HUVEC增殖的活性依次如下：秭锄in，moscatilingigantolDC—18bakt协inIIl；tristin对HUVEC静息期 和生长因子刺激的增殖无影响。结论联苄类化舍物的母核可能是抗血管新生作用的药效团。 关键词：石斛；联苄类化舍物；抗血管新生 1．04．06l DOI标识：doi：10．3969／_i．issn．1008旬805．20l 中图分类号：R962文献标识码：B 文章编号：1008旬805(2011)04·0919旬2 血管生成是指通过血管内皮细胞迁移、增殖，在原有的血管 上以出芽的方式生长出新的血管网，是机体严格控制的一个多因 素、级联、整体、动态的过程’“。 公司。实验中所用其它试剂均为国产分析纯。 Folkm加和Hanahan教授率先提出了血管生成的“开关平衡 假说”，认为血管生成受到多种促血管生长因子和抗血管生长因 子共同调控。在病理因素作用下，促血管生长因子异常表达，抑 制血管生长因子表达过低，打破了机体对血管形成的动态调控平 衡，原来静止的血管内皮细胞将迅速增生，最终导致病理性新生 R2 血管生成，常常出现在慢性炎症与纤维化、肿瘤生长与转移、糖尿 病视网膜疾病、银屑病、风湿性关节炎等疾病中一“J。 石斛为兰科植物金钗石斛眈，曲_D6i肌础如“ndl．、铁皮石 斛眈，砌D6i啪c口以d啪Wall．ex“ndl．或马鞭石斛珧蒯r06ium —m6砌￡“mHook．var．0c￡如￡啪Hook．及其近似种的新鲜或干燥 圈l 石斛中联苄类化合物结构式 表l 石斛中联苄类化合物取代基团分布 茎，味甘、性微寒，归肺、胃、肾经。“。《神农本草经》中记载石斛 具有生津养胃、滋阴清热、润肺益肾、明目的功效。我们实验室前 期已经报道石斛中联苄类化合物毛兰素(eri枷n)可以明显抑制 生长因子诱导的HUVEC细胞的增殖，从而发挥其抗肿瘤活 性8’…。本文分析并比较从兰科植物叠鞘石斛和晶帽石斛中分 离所得的几个不同结构的联苄类化合物对生长因子诱导的人脐 静脉内皮细胞增殖的影响，初步探讨了其构效关系。 l 材料与仪器 1．4 1．1新生儿脐带由上海国际和平妇婴保健院提供。在无菌条 件下，于健康产妇分娩后立即取新生胎儿脐带，长度20cm左右， 置于4℃HBSS中，lh内送细胞培养室。 96孔培养板和离心管(德国Greiner公司)。 1．2 药物moscatilin，tristin和舀gantol是从兰科植物叠鞘石斛2 方法 III，Dc—18(3，5一dimethox- 中分离提取的单体化合物，batatasin 2．1 药物配制石斛中联苄类化合物用二甲基亚砜(DMs0)溶 yl一4，47，dihydroxylbibeIlzyl)和eriaJIin是从兰科植物晶帽石斛 解，配成母液浓度为0．1moL／L，母液均用一次性灭菌滤器(0．22 中分离提取的单体化合物，均由上海中医药大学中药研究所提 斗moL／L)过滤灭菌。加药时用无血清M199培养基配制所需的5 供