键合表柔比星纳米胶束对Walker256细胞株的增殖抑制作用.pdfVIP

塞瞳堑笠链金盔丞出星纳苤膣塞过里型!!!兰堑绁龅挂煎埴殖地趔佳厦筮i魍 ·843· 键合表柔比星纳米胶束对Walker-256细胞株的增殖抑制作用 宋晓斌1 刘铜军胡秀丽2柳时2宿晓云3景遐斌2 (吉林大学第三医院结直肠肛门外科，吉林 长春 130033) (摘要) 的增大，抑制率逐渐增高。结论利用酸降解腙键合成的EPI．NPs具有良好的细胞内缓释性和细胞毒性。 [关键词)纳米胶束；表柔比星；细胞内缓释；pH敏感 【中图分类号) R979．1；0253[文献标识码】A [文章编号】10惦-9加2(2011105-0843-841 表柔比星(EPI)作为一种细胞周期非特异性药物，其主要NPC)的二氯甲烷溶液中。室温反应2h后用冷的乙醚沉淀出 作用部位是细胞核，通过与DNA结合抑制核酸的合成和有丝 分裂。其毒副作用较阿霉素(ADM)低，尤其是心脏毒性明显降DHP／NHNH：)。接下来聚合物侧链卜的酰肼基与表柔比星分 低。因此，EPI在临床上已逐渐代替ADM，成为乳腺癌等多种子中的羰基反应，将表柔比星通过腙键键合到聚合物上。获得 恶性肿瘤的一线用药。但EPI存在蒽环类抗癌药常见的毒副 作用，使其用药剂量及次数受到限制，同时由于其半衰期较短， g)和表柔比星(86rIlg)溶解在二氯 (LA-co—DHP／NHNH2)(0．2 血药浓度衰减迅速，大大影响r化疗效果。因此，以提高药效 甲烷中(10m1)，向反应体系中加入TEA(0．057m1)，室温搅 和降低药物副作用为目的的药物缓释及导向系统逐渐成为国 拌48h(聚合物中酰肼彩表柔比星／TEA摩尔比为1／1／4)。 内外学者研究和讨论的热点。本实验旨在观察表柔比星纳米 将反应混合物放入透析袋中(截留分子量Mn=3500)，放入盛 胶束(EPI．NPs)在体外的释药特点及对Walker-256细胞株的增有双蒸水的大烧杯中，每天换两次水，透析3d。冷冻干燥透析 殖抑制作用，为其临床应用提供理论依据。 产物，就可得到表柔比星纳米胶柬的冻干粉制剂。胶柬中EPI nm处的紫外吸收光 的含量通过测定胶束的DMSO溶液在480 1材料与方法 谱，对照表柔比星纯药在DMSO中的标准曲线算出。 1．1 1．3 纳米胶柬的形貌及粒径的表征胶束表面形貌：将胶束 实验材料及主要测试仪器Walker-256细胞株购自北京 中科院肿瘤研究所；PEG—b-P(LA一130-DHP／NPC)[羟基经NPC配制成0．5ms／n[1l的水溶液，滴加到干净的硅片表面，自然风 干后，场发射扫描电子显微镜下观察。胶束的粒径及分布：用 活化的聚乙二醇．b．聚(乳酸-CO-碳酸酯)共聚物]由长春应用化 ESEM 学研究所聚合制备…，场发射扫描电镜(ESEM，XL30 动态光散射法测量，配制0．3ms／nll的胶束水溶液，过滤除杂 TCS SP2，激发 质后装入干净的散射池中。 FEG，Philips)；激光共聚焦显微镜(CI．．SM，Leica 光为543am氦一氖激光)；紫外可见分光光度计(UV-2401)；动1．4 态光散射(DIS，散射角为90。，测试温度为25。C恒温，垂直偏振 ml 并置于透析袋内，透析袋放在一个装有25 PBS缓冲液的小 氩离子激光)。 广口瓶中。将上述样品置于振荡培养箱中，温度保持在37℃。 1．2 应用透析法制备化学键合的表柔比星纳米胶束通过腙