IBDV超强毒GX8／99株的细胞适应毒和鸡体传代毒的致病性和VP5基因的比较.pdfVIP

中国兽医学报 2008年1O月 第28卷 第】O期 ChinJ fSciOct．2008 Vo1．28 No．10 1133 IBDV超强毒GX8／99株的细胞适应毒和鸡体传代毒的致病性和VP5基 因的比较 朱秀同，崔治中 ，孙淑红，娄本红 (山东农业大学动物科技学院，山东泰安271018) 摘要 ：传染性法氏囊病病毒(InfectiousBursalDiseasVirus，IBDV)的超强毒株 GX8／99经在鸡胚成纤维细胞(CEF) 上连续盲传 23代后，细胞适应毒株 GXC23对鸡的致病性显著减弱，对 4～6周龄 SPF鸡的致死率从 85 ～90 减 为 0～5 。GXC23在 96孔细胞培养板上经 2次无限稀释法后得到 3个克隆病毒 。经 SPF鸡 回传 2o代后 ，相应 的毒株 GX一2B20GX一4B20、GX一5B20对 SPF鸡 的致死率仍维持在 0～5 。序列 比较表明，GX8／99在传代过程 中，其细胞适应毒GXC23有 8个碱基突变，其中5个碱基突变导致了氨基酸改变。bp#2T—c突变，导致传代毒 ORF中的起始编码子后移 了4个氨基酸。而 3个克隆化病毒 回鸡2O代后致病性不变，这几个位点也保持不变，且 与 3个疫苗株完全一致。进一步分析表明，有 4个超强毒株和 4个强毒株的VP5基因的5个位点与GX8／99原始 毒相同，而另3个超强毒及 6个强毒株与细胞适应毒GXC23一致。这些结果表明，超强毒GX8／99在细胞传代过 程 中VP5基因上 5个氨基酸的变异主要与适应细胞培养相关而与致病性无关。 关键词 ：IBDV；细胞适应毒 ；鸡体传代毒 ；致病性 ；VP5 中图分类号 ：$852．65 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005—4545(2008)1O一1133一O4 ComparisonsofpathogenicityandVP5geneoftheveryvirulentinfectiousbursal diseasevirusstrainGX8／99anditscell—adaptedvirusandchickenbackpassaged viruses ZHUXiu—tong，CUIZhi—zhong 。SUNShu—hong。IOU Ben—hong (CollegeofVeterinaryMedicine， ShandongAgriculturalUniversity，Taian，Shando~lg 71018。China) Abstract：A veryvirulentinfectiousbrusalvirus(vvlBDV)strainGX8／99waspassagedblindlyincellcultruefor 23passages．pathogenicityofthecelladaptedvirusGXC23signifcantlydecreasedfrom 85 一90 to0-5 ofmortal— itywhen46weeksSPFchickenswerechallengedwiththem ．TheGXC23wasclonedtwicebyunlimiteddilutionsin 96一wellplates．3clonesofwhichwerebackpassaged．Themortalityinchickenschallegedwith3baekpassagedviruses GX 2B20、GX一4B20、GX 5B20wasstillaslow asGXC23intherangeof0-5 ．ThesequencecomparisonofVP5 genesofGX8／99andGXC23demonstratednlutationsof8basesitesand5ofthem madetheaminoacidchanges．Es— pecially．themutationfrom T toC atbp#2ofVP5genemadeGXC23toloseitsfirst “ATG”and4aaattheN—ter minalofVP5protein．Themutationswereverysimilarto3vaccinestrains．Furthermore，suchmutation