不同非氧化磷酸戊糖途径基因的过表达对酿酒酵母木糖发酵性能的影响.pdfVIP

2015年 1月 化 学 工 业 与 工 程 第 32卷 第 1期 Jan．2O15 CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING VOJ_32 NO．1 doi：10．13353／j．issn．1004．9533．2015．01．013 不 同非氧化磷酸戊糖途径基 因的过表达对 酿酒酵母木糖发酵性能的影响 孙锦云，高文萱，丁文涛，刘 文，陈 洵 (天津大学化工学院，天津 300072) 摘要：以双拷 贝过表达木糖代谢上游途径关键酶 (木糖还原酶 XR、木糖醇脱氢酶 XDH和木酮糖激 酶XKS)的酿酒酵母 菌株为背景，在过表达非氧化磷酸戊糖 (PP)途径 中转醛酶基 因TALl的基础 上，对途径 中其他基因 TKL1(转酮酶)、RPE1(核酮糖一5一磷酸差向异构酶)和 RKI1(核酮糖一5一磷酸 异构酶)进行 了不同程度的过表达，以研 究PP途径基 因过表达对酿酒酵母木糖代谢的影响。在不 同培养基条件下对重组菌株木糖代谢进行研 究，结果显示，在过表达 TALl的基础上不 同组合过表 达PP途径其他基 因不同程度改善 了酿酒酵母木糖发酵性能 ，重组菌株能在 36～48h耗完质量分 数 (下同)为5％的木糖。其中，过表达 PP途径全部基因比其他过表达基 因组合表现 出明显的优 势，在8％木糖发酵条件下其 乙醇产量达到 了每 1g木糖0．337g，较对照菌株提 高了7．86％。这说 明同步过表达 PP途径基因更有利于酿酒酵母木糖发酵。 关键词 ：酿酒酵母 ；非氧化磷酸戊糖途径；木糖；乙醇 中图分类号 ：Q78 文献标志码 ：A 文章编号 ：1004—9533(2015)01—0064—07 XyloseFermentation PerformanceofSaccharomycescerevisiaewith DifferentCombination oftheoVerexpressedNon-OxidativePentose PhosphatePathwayGenes SunJinyun，GaoWenxuan，DingWentao，LiuW en，ChenXun (SchoolofChemicalEngineeringandTechnology，TianjinUniversity，Tianjin300072，China) Abstract：Tostudytheinfluenceofnon—oxidativepentosephosphatepathway(PPP)onxyloseutilization inSaccharomycescerevisiae，differentcombinationsofPPP genesTKL1，RPE1 and RK／1wereoverex— pressedintheTALl-enhancedyeaststrain，whichalsohadthedouble-copyintegrationofupstream path— waygenesXYL1．XYL2andXKS1．Performanceofrecombinantyeastswasinvestigatedatboth5 ％ and 8 ％ xyloseaswellasglucoseandxylosemixture．resultsshowedthatoverproductionofPPPgenesstimu— latedcellgrowth and xyloseconversion atbothxyloseconcentrations，concomitantwithhigherethanol yieldattheexpenseofxylitolandglycerolformation．andallrecombinantstrainscanuseup5 ％ xylose within36 to48h．YeaststrainsofS．cerevis