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2013浙科版选修1第四部.分《实验十一 植物的组织培养》word素材1.doc
高中生物 实验11植物的组织培养 浙科版
核心解读HEXINJIEDU
1.植物组织培养所依据的原理是什么?植物组织培养所依据的原理是:细胞的全能性(植物细胞的全能性)。
(1)细胞的全能性:一个细胞具有发育成完整个体的潜能。
(2)细胞具有全能性的原因:
生物体细胞一般都是由受精卵经有丝分裂形成的,因而都含有生物一整套遗传物质,都具有发育成完整个体的潜能。
(3)细胞全能性表达的条件:
①在生物体上时不能表现出其全能性,只能通过细胞分化形成不同的组织、器官,这是在特定的环境、激素等的影响下基因选择性表达的结果。
②细胞表现其全能性的条件
首要条件是脱离母体,另有以下几点:
A.植物细胞
a.植物组织培养时,培养基中除含有一定的水分、无机盐外,还要添加一定的植物激素(如生长素、细胞分裂素),这有助于愈伤组织分化为不同组织、器官。
b.在植物组织培养的前期对光照无需求,在后期需要光照条件,这有利于细胞生长、分化。
B.动物细胞:由于受到某些因素的制约,其全能性不易表达,但其核仍具有全能性。
2.进行植物组织培养时应注意的问题有哪些?
(1)所有实验用具严格灭菌。
(2)接种过程要求严格的无菌操作。
(3)愈伤组织培养。最初避光培养,后期见光培养。
(4)试管苗培养。要先进行生芽培养,再进行生根培养,试管苗培养要在光照条件下进行。
3.由花粉经植物组织培养成的植株与由植物营养器官(如:茎)培养成的植株一样吗?
这两个植物组织培养的过程基本相同,但其实质相差甚远,具体请参看下表理解。
花粉植株的产生和植物茎的组织培养的比较菊花茎的组织培养月季的花药培养理论论据植物细胞的全能性基本过程脱分化、再分化影响因素选材、营养、激素、pH、温度、光照等操作流程制备固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育生殖类型无性生殖有性生殖(花药离体培养法)植株属几倍体与原材料植株相同(二倍体或四倍体等)是原材料植株的单倍体植株4.为什么说无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键?
植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高,对无菌操作的要求非常严格。如果不小心引起污染,将可能造成培养工作前功尽弃。
无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时,一方面要考虑药剂的消毒效果;另一方面还要考虑植物材料的耐受能力。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。
5.任何植物组织培养所使用的生长素和细胞分裂素的浓度都相同吗?
不同物种的植物不可贸然使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度,要探索使用何种激素(合成激素)以及激素的浓度才成。可以参考已发表文献上成熟的经验,也可自己探索。
6.本实验用人工合成的激素,而不用植物中存在的天然激素,为什么?
植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶,这样,天然激素在植物体内作用和存在的时间就较短,而人工合成激素在植物中没有相应分解它的酶,所以作用和存在的时间长,作用效果明显。
7.影响植物组织培养的因素有哪些?
不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。例如,烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此,植物材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
离体的植物组织和细胞,对营养、环境等条件的要求相对特殊,需要配制适宜的培养基。常用的一种培养基是MS培养基,其主要成分包括:大量元素,如N、P、K、Ca、Mg、S;微量元素,如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co;有机物,如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素以及蔗糖等。在配制好的MS培养基中,常常需要添加植物激素。
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。按照不同的顺序使用这两类激素,会得到不同的实验结果。
使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但细胞不分化 先使用细胞分裂素,后使用生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 当同时使用这两类激素时,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。可见,植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等,都会影响实验结果。植物激素的应用要做到得心应手,还得靠大量实践。
除了上述因素外,pH、温度、光照等条件也很重要。不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行菊花的组织培养,一般将pH控制在5.8左右,温度控制在18~22 ℃,并且每日用日光灯照射12 h。
题例领悟TILILINGWU
【例题1】 植物
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