微生物脂肪酶纯化方法研究进展.pdfVIP

2009NO．16 。S。‘c。。。i。e‘。n。。c’。。e。。。一andTechnologyInnovationHerald 技术创新 微生物脂肪酶纯化方法研究进展① 李永莉， 吕新宇2 周斌1 张启蒙3 李树白3 (1．常茂生物化学工程股份有限公司 江苏常州 213034；2．江苏工业学院精细化工研究所江苏常州213164；3．常州工程职业技 术学院化学工程技术系 江苏常州 213164) 摘要：本文通过时比不同来濠的庸肪酶的分鼻地化方法，辖连了近年来田内外研究人五在t生糟詹肪肆分鼻纯化方面的研究进展。 关键词：截生物脂肪謦 纯亿方法 研究进展 中图分类号zTQ641 文献标识码：A 文章编号：1074一098x(2009)06(·)一0014—09 脂肪酶的分离和纯化是研究其酶学性 性较水低的界面都有较高的亲和力，这些 除菌丝体、超滤浓缩酶液、硫酸铵盐析或有 质、结构与功能的基础，是整个脂肪酶研究 界面可以不可逆地吸附脂肪酶，使得脂肪 机溶剂萃取等步骤。预纯化过程之后，一般 酶很容易失活。除r以上两个因素外，分离 再用层析方法进一步分离以获得高纯度的 中很重要的一个环节。Rolf等“1认为在脂肪 酶的分离纯化中，主要存在以下几个问题： 纯化时间长，回收率低，成本过高也是一个 脂肪酶。层析方法包括离子交换层析(Q— (1)微生物发酵合成的是包括脂肪酶在内的值得关注的问题。 S一 200 酶的混合物，从而给下游的酶分离纯化造 脂肪酶分离纯化的过程一般包括预纯 SF)、亲和层析等方法。一般用酶活回收 成压力，而且脂肪酶还有可能被蛋白酶分 化过程和层析分离两个过程。预纯化过程 率、比活力和纯化倍数等指标来衡量脂肪 解，(2…一肪酶不仅对油一水界面，而且对极 包括细胞破碎(胞内脂肪酶)、离心或过滤去 酶分离纯化的程度。本文根据脂肪酶来源 的不同，对其分离纯化方法进行分类对比． 表1 革兰氏阳性细菌产脂肪酶的分离纯化 1细菌类 细菌类可以产脂肪酶的菌属的种类较 多，主要分两大类：革兰氏阳性细菌和革兰 氏阴性细菌，革兰氏阳性菌又包括芽孢杆 菌属，乳酸杆菌属，葡萄球菌属链球菌属， 微球菌属，丙酸菌属等，革兰氏阴性菌又包 括假单胞菌属，气单胞菌属等。 1．1革兰氏阳性细菌 从此类菌属中分离纯化脂肪酶的研究 主要集中在芽孢杆菌属。Sharma等研究了 BacilluS