微生物转化普伐他汀过程中相关组分的调控.pdfVIP

!璺苎竺童苎查!!竺!!望竺竺兰竺!塑———————————————————————旦 微生物转化普伐他汀过程中相关组分的调控 therelated in of compounds Regulation fermentation pravastatin process 徐会根韩明活熊志 and zhi Xu Ming-huoXiong Hui—gen，Han (广东蓝宝制药有限公司， 清远511515) Phamlaceutlcal 511515) BlueTreasure Co，I．td．，Qingyuatl (Cuang‰g 摘要： 目的研究美伐他汀经微生物转化制备普伐他汀过程中降低相关组分含量的办法。方法通过 C18(100rmrTi×4．On矾， 调整Acti，tomadum菌株的培养条件，HPLC方法测定相关物总含量的变化，HypersiI 5肿)柱，甲醇：磷酸盐缓冲液为流动相。结果 实验表明，在种龄60h，温度30(2，培养基中酶母粉、 当，相关物总含量从12．6％降至5．0％以下。结论按本工艺，提取步骤得以简化，精制品质量稳定。 关键词：美伐他汀；普伐他汀；微生物转化；相关物； 古量 中囤分类号：TQ465 文献标识码：A 0．5，消沫剂1．0，消 普伐他汀是一种有效的调血脂药现已在全世界范 20．0，麦芽浸出物20．0，KH2P04 围内被广泛应用。目前普伐他汀的生产工艺大多以美 前调piT／．2。250m|三角瓶装50ml培养基。 伐他汀为原料制备而得，其中以微生物转化法最为方 葡萄糖40．0，酵母粉 1．2．3发酵培养基(g屯) 便、廉价。我公司采用国外引进的微生物转化法已成 功开发生产了普伐他汀产品。但是在普伐他汀微生物 pH7．0～7．2。 转化过程中，产生了多种普伐他汀相关物(目前已知结 1．3试验罐发酵 构的就有10种)。我们在生产实践中发现，发酵液中 20L试验罐冰箱保存的冷冻管，室温融化后转 普伐他汀相关物的总含量较高且批问差异很大，严重 接于斜面，35℃培养8d；待孢子成熟后转接于种子培 影响了成品的质量。目前有效控制成品相关物含量的 办法是增加提取精制步骤。但这不仅增加了工作量、 降低了提取收率，而且也影响到了成品质量的稳定性。 本文通过对各种可能的影响因素进行考察，并总 伐他汀，9d后放罐并测定普伐他汀含量。 结出新的发酵工艺，在不降低原生产水平的基础上，使 500L试验罐冰箱保存的冷冻管，室温融化后转 相关物的总含量降低到5％以下。 接于斜面，35℃培养8d；待孢子成熟后刮下孢子，按l 1材料与方法 1．1菌种 由外国引进的Actinomadura属菌株。 1．2培养基 气流量0．5vvm培养，按工艺中途补加美伐他汀，9d后 1．2．1