PU 第12章吸光光度分析.pptVIP

* 第十二章 吸光光度分析法 介绍，不考试 * 吸光光度法:是基于物质分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。 吸光光度法分类： 1. 按物质吸收光的波长不同，可分为可见分光光度法、紫外分光光度法及红外分光光度法。 2. 按照所用仪器不同可分为： 目视比色法、光电比色法和分光光度法。 概 述 * 吸光光度法的特点 ⒈灵敏度高 常用于测定试样中质量分数为10-2～10-5的微量组分，甚至可以测定痕量组分（百万分之一以下）。而容量分析法和重量分析法一般用于常量组分的测定。 ⒉准确度较高 一般比色法的相对误差为5%～10%，分光光度法为2%～5%。 ⒊操作简单、分析速度快 * 一、光的基本性质 紫外 紫 蓝 青 绿 黄 橙 红 红外 400 450 480 500 560 600 650 700 750 800nm 光是一种电磁波，不同颜色的光具有不同的波长及频率。 波长(nm) 800 700 600 500 400 分析方法 可见分光光度法 紫外分光光度法 红外分光光法 * 1.物质对光的选择性吸收 当一束光照射到某物质或溶液时，只有照射光中光子的能量与被照射物质粒子的基态与激发态能量之差相等时的那部分色光才被物质或其溶液吸收，称为光的选择性吸收. 二、光的选择性吸收 * KMnO4呈紫红色 （吸收黄绿色光，透过了红光和紫光） CuSO4呈蓝绿色（吸收黄光，透过了蓝光） KMnO4 CuSO4 1）溶液颜色是由溶液中的物质对不同波长的光的选择性吸收产生的。 2.溶液颜色的产生 * 2）物质吸收的是溶液颜色的互补色光 白光 红 橙 蓝 青蓝 青 黄 紫 绿 * ⒈透光率和吸光度 透光率越小，吸光度越大，光吸收越强 三、吸光分析基本定律 透光率 吸光度 * 三、吸光分析基本定律 2. 朗伯-比尔定律： 当一束单色光通过一定浓度均一、透明的溶液（非散射）时，溶液对光的吸收度A与吸光物质的浓度c和液层厚度b的乘积成正比。 A：吸光度 c：溶液的浓度 mol·L-1 b：液层的厚度 cm κ：摩尔吸光系数 L·mol-1·cm-1 A＝κbc * 通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光。 波长可调，故选择性好，准确度高。 分光光度计的基本部件 光 源 单 色 器 吸 收 池 检 测 器 信号 显示 装置 1 2 3 4 5 四、方法和仪器：分光光度计 * 721型分光光度计 比色皿 * 图：检流计标尺中吸光度与透光率的关系 * 紫外及可见分光光度计 * Blank Standard Sample Sample 五、定量分析方法 ⒈标准曲线法 Ax Cx * 2.标准对照法(直接比较法) 将待测试样溶液和一个标准溶液在相同条件进行显色、定容，分别测出它们的吸光度，按下式计算被测溶液的浓度。 用一份标准溶液即可计算出被测溶液的含量或浓度，方便，操作简单。 A＝κbc 五、定量分析方法 * 吸收曲线 1）表明物质对不同波长的入射光的吸收能力。 2）物质对光的吸收 是选择性的，其 吸收波长及吸收 能力是与物质的 组成和结构直接 关联的。 朗伯-比尔定律的应用 * 3）物质的种类与曲线的形状一一对应。物质不同曲线形状不同，最大吸收波长不同。浓度不同不影响曲线的形状，只影响曲线的高低。 最大吸收波长（λmax） ： 吸收程度最大的光的 波长为最大吸收波长。符号： λmax物质不同λmax值不同 4）物质的吸收曲线为连续曲线。 λmax λmax * Infrared spectroscopy of Phenyl Acetic Acid 苯乙酸红外光谱（吸收曲线）